摘要:目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠中肠源性及肝源性高迁移率族蛋白B1(HMGB1)经外泌体的释放情况及其调控途径。方法15只雄性8周龄野生型C57BL/6J小鼠及10只合并肠道菌群紊乱的NAFLD小鼠(ASC-/-)模型。10只野生型小鼠喂食正常饲料(ND)为正常对照组、喂养高脂饮食(HFD)为高脂饮食组,每组5只,另外5只用于了解造模情况。10只ASC-/-小鼠分别 喂养ND(菌群紊乱组)及HFD(高脂菌群紊乱组),每组5只。共喂养8周。采用共聚焦显微镜检测肝脏及肠黏膜外泌体标志物与HMGB1共定位情况;采用Western blotting及PCR等方法检测外泌体中HMGB1含量。通过棕榈酸(PA)及脂多糖(LPS)处理AML12细胞24 h构建体外模型,采用Western blotting检测HMGB1/CD63水平,并通过siRNA干预探讨经外泌体释放的调控机制。结果高脂饮食组的外泌体分泌较正常对照组增多[(3.5±0.2) ng/ml vs. (1.1±0.3) ng/ml,P<0.05],高脂菌群紊乱组的外泌体亦高于菌群紊乱组[(3.2±0.2)ng/ml vs. (1.9±0.4) ng/ml,P<0.05]。免疫荧光检测结果显示,体内实验高脂饮食组与正常对照组比较,体外实验高脂内毒素组与空白对照组比较,外泌体标记物(ALP或VPS16)与HMGB1的共定位增加。PCR检测发现,高脂饮食组肝细胞外泌体中的HMGB1较正常对照组升高(41.5±10.2 vs. 1.3±0.3,P<0.05),高脂菌群紊乱组较菌群紊乱组升高(48.6±7.2 vs. 1.5±0.5,P<0.05);高脂饮食组TLR4较正常对照组升高(13.8±6.2 vs. 2.8±0.9,P<0.05),高脂菌群紊乱组较菌群紊乱组升高(22.6±4.1 vs. 2.5±1.5,P<0.05)。在肠黏膜细胞中,高脂饮食组较正常对照组(0.6±0.2 vs. 0.4±0.1,P<0.05)及高脂菌群紊乱组较菌群紊乱组(0.9±0.2 vs. 0.5±0.1,P<0.05)中HMGB1与外泌体标记物(CD63)共显影增加。在体外实验中,内毒素组、高脂内毒素组外泌体的HMGB1(5.1±0.8,5.5±0.7)均较空白对照组(3.8±0.6)增加(P<0.05),而siRNA干预组与空白对照组比较无明显差异(3.7±0.6 vs. 3.8±0.6,P>0.05)。结论在高脂饮食及肠道菌群紊乱环境下,HMGB1在肝细胞及肠细胞中经外泌体释放,并受TLR4调控,可能是促进脂肪性肝炎发展的因素之一。
摘要:目的评估改良去骨瓣减压术处理创伤性脑损伤的有效性和安全性及对患者血清炎性介质水平与预后的影响。方法选择2020年6月-2022年1月南阳市中心医院神经外科收治的82例创伤性脑损伤患者,根据去骨瓣减压手术方式不同分为标准组与改良组,各41例。标准组给予标准去骨瓣减压术,改良组给予改良去骨瓣减压术。比较两组术中出血量,手术时间,住院时间,术前、术后6 h、术后3 d的血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S-100钙结合蛋白B(S-100β)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白细胞介素-6(IL-6)水平,术后1个月格拉斯哥预后量表(GOS)评分、并发症发生情况及切口愈合等级。结果与标准组比较,改良组住院时间明显缩短(P<0.05),术中出血量、手术时间差异无统计学意义(P>0.05);改良组术后6 h、术后3 d 血清NSE、S-100β和炎性因子CRP、PCT、IL-6水平明显低于标准组(P<0.05)。术后1个月改良组GOS评分预后良好率高于标准组[82.9%(34/41)vs. 63.4%(26/41),P<0.05],并发症发生率低于标准组[2.4%(1/41) vs. 19.5%(8/41),P<0.05],切口愈合分级优于标准组(P<0.05)。结论改良去骨瓣减压术处理创伤性脑损伤,可减轻脑损伤与手术创伤应激,减少并发症发生,加快患者术后康复进程,提高预后良好率,改善切口愈合分级,有效性与安全性较好。