指南与共识

基础研究

SE-hBCG对重组巨细胞病毒糖蛋白B及冻干人用狂犬病疫苗免疫原性的影响 封面论文 封底论文 增强出版 AI导读

李廷慧, 李彬钰, 马锡惠, 何秀云

2021, 46(12): 1174-1180. DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2021.12.02

摘要：目的探讨含角鲨烯的水包油纳米乳剂-热灭活卡介苗(SE-hBCG)对重组巨细胞病毒糖蛋白B(CgB)及冻干人用狂犬病疫苗(Rab)免疫原性的影响。方法选取145只SPF级6~8周龄雌性BALB/c小鼠进行以下实验。实验1：取25只小鼠，分成SE组、SE-hBCG组、CgB组、SE+CgB组、SE-hBCG+CgB组等5组，每组5只；于实验开始第0、2、4周分别给每只小鼠肌内注射SE、SE-hBCG、CgB、SE+CgB、SE-hBCG+CgB各0.2 ml，末次免疫后2周解剖小鼠。实验2：取120只小鼠，分成PBS组、Rab组、SE+Rab组、SE-hBCG+Rab组等4组，每组30只；于实验开始第0周及第1周每只小鼠分别腹腔注射PBS、Rab、SE+Rab、SE-hBCG+Rab各0.2 ml，于初免后第4、8、10、12、14、35天各解剖5只小鼠。无菌摘取小鼠脾脏，制备脾淋巴细胞悬液，采用酶联免疫斑点实验(ELISPOT)检测抗原特异的IFN-γ或IL-4的斑点形成细胞数(IFN-γ-SFC或IL-4-SFC)；取小鼠眼球血，离心后收集血清，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗原特异的IgG水平。结果SE-hBCG组诱导小鼠产生CgB特异的IFN-γ-SFC(266.0±87.9)高于SE组(104.5±28.8，P<0.05)；SE-hBCG+CgB组诱导小鼠产生抗-CgB IgG抗体滴度(18 800.0±2396.0)及CgB特异的IFN-γ-SFC(440.5±38.4)高于CgB组(抗体滴度为3333.0±737.9，IFN-γ-SFC为189.2±21.4，P<0.05)。SE+Rab或SE-hBCG+Rab初免后第4天可诱导低水平抗-Rab IgG抗体(OD₄₅₀≤0.2)；Rab、SE+Rab及SE-hBCG+Rab组抗-Rab IgG抗体均于初免后第12天达到峰值；SE-hBCG+Rab组于初免后第8、10、14及35天检测的抗-Rab IgG抗体(分别为1700.0±200.0、19 400.0±1661.3、23 000±358.9、23 600.0±6038.2)均高于Rab组(分别为310.0±97.9、6730.0±1655.4、6000.0±1655.6、4400.0±1655.5，P<0.05)。SE-hBCG+Rab组初免后第4、8、14及35天检测的Rab特异IFN-γ-SFC(分别为110.8±52.5、213.0±29.7、105.2±33.7、80.4±36.8)均高于对照组(分别为6.4±3.5、32.2±12.9、11.4±5.1、4.4±2.5，P<0.05)。结论SE-hBCG可增强CgB及Rab的免疫原性，是一种较好的免疫增强剂。  

关键词：水包油纳米乳剂;卡介苗;巨细胞病毒糖蛋白B;狂犬病疫苗  

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更新时间：2022-12-03

论著

全胃肠外营养对幼鼠心肌的损伤作用及其机制 封面论文 封底论文 增强出版 AI导读

孙晓东, 沈蕾蕾, 郑瑞雪, 赵庆宁, 陈盛

2021, 46(12): 1181-1187. DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2021.12.03

摘要：目的探讨全胃肠外营养(TPN)对幼鼠心肌的损伤作用及机制。方法选取24只6~8周龄雄性SD幼鼠，随机分为四组(n=6)：正常组、对照组、TPN-7 d组和TPN-14 d组。其中，正常组不置管，自由进食水；对照组经右颈静脉置管，持续输注生理盐水并自由进食水；TPN组经右颈静脉置管，持续输注TPN营养液并禁食禁水。分别在建模第14、14、7、14天处死各组幼鼠，获取心肌组织。采用HE染色观察各组幼鼠心肌组织的病理变化，TUNEL染色观察各组幼鼠心肌细胞凋亡情况，ELISA法检测各组幼鼠心肌组织中丙二醛(MDA)及过氧化氢(H₂O₂)含量变化，qRT-PCR和Western blotting、免疫荧光染色检测各组幼鼠心肌组织中髓过氧化物酶(MPO)的表达情况。结果TPN-7 d组中50%的幼鼠心肌组织出现轻度损伤，TPN-14 d组幼鼠的心肌组织均出现轻到重度损伤；与正常组和对照组比较，TPN组心肌细胞凋亡率明显增高(P<0.05)，MDA及H₂O₂含量明显增高(P<0.05)，MPO mRNA、MPO蛋白及免疫荧光表达增强(P<0.05)；TPN-14 d组心肌细胞凋亡率、H₂O₂含量、蛋白及免疫荧光表达水平均明显高于TPN-7 d组(P<0.05)。结论1周以上的TPN可导致幼鼠心肌损伤，其损伤程度随TPN使用时间的延长而加重；氧化应激可能是其损伤机制之一。  

关键词：全胃肠外营养;心肌损伤;氧化应激;髓过氧化物酶  

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更新时间：2022-12-03

lncRNA NEAT1激活PI3K/Akt信号通路对Aβ_25-35诱导的PC12细胞凋亡的影响及机制 封面论文 封底论文 增强出版 AI导读

翟志恒, 田杨, 周玉妮, 宋玉成

2021, 46(12): 1188-1195. DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2021.12.04

摘要：目的探讨lncRNA NEAT1通过激活PI3K/Akt信号通路对Aβ_25-35诱导的阿尔茨海默病(AD)模型细胞凋亡的影响及可能机制。方法以0、5、10、20 μmol/L Aβ_25-35诱导PC12细胞，构建AD细胞模型。用5 μmol/L Aβ_25-35处理PC12细胞，并于24、48、72 h采用qRT-PCR检测lncRNA NEAT1相对表达水平。取PC12细胞，(1)设置对照组、敲降lncRNA NEAT1组、si-NC组、空载体组及过表达lncRNA NEAT1组，对照组不做任何处理，其余4组分别用含si-lncRNA NEAT1、si-NC、pcDNA3.1-NC、pcDNA3.1-lncRNA NEAT1的Opti-MEM培养基培养并转染8 h，然后使用20 μmol/L Aβ_25-35处理。采用qRT-PCR检测lncRNA NEAT1相对表达水平；CCK-8法检测细胞活力；流式细胞术检测细胞凋亡情况，并以G₁和G₂期细胞比例反映细胞增殖情况；ELISA法检测细胞上清中炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。(2)设置对照组、空载体组及过表达lncRNA NEAT1组，采用Western blotting检测p-PI3K、p-Akt蛋白相对表达水平。(3)设置对照组、si-NC组、敲降lncRNA NEAT1组、空载体组、过表达lncRNA NEAT1组及过表达lncRNA NEAT1+LY294002组，过表达lncRNA NEAT1+LY294002组细胞转染pcDNA3.1-lncRNA NEAT1后，加入10 μmol/L PI3K通路抑制剂LY294002处理，采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果不同浓度的Aβ_25-35均可明显抑制lncRNA NEAT1的表达，且呈浓度依赖性(P=0.001)。与空载体组相比，过表达lncRNA NEAT1组lncRNA NEAT1相对表达水平、细胞增殖率、G₂期细胞比例明显增高，细胞凋亡率、G₁期细胞比例明显降低(P<0.05)；与si-NC组相比，敲降lncRNA NEAT1组lncRNA NEAT1相对表达水平、细胞增殖率、G₂期细胞比例明显降低，细胞凋亡率、G₁期细胞比例明显升高(P<0.05)。ELISA检测结果显示，与空载体组相比，过表达lncRNA NEAT1组细胞上清中IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平明显降低(P<0.05)；与si-NC组相比，敲降lncRNA NEAT1组细胞上清中IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平明显升高(P<0.05)。Western blotting检测结果显示，与空载体组相比，过表达lncRNA NEAT1组信号通路相关蛋白p-PI3K、p-Akt相对表达水平增高(p-PI3K：0.86±0.05 vs. 0.15±0.02，P=0.003；p-Akt：0.86±0.06 vs. 0.11±0.04，P=0.000)。与过表达lncRNA NEAT1组相比，过表达lncRNA NEAT1+LY294002组细胞凋亡率明显升高(9.00%±0.10% vs. 5.13%±0.21%，P=0.004)。结论lncRNA NEAT1可通过调控PI3K/Akt通路促进Aβ_25-35诱导的PC12细胞增殖，抑制PC12细胞凋亡。  

关键词：阿尔茨海默病;长链非编码RNA;核富集转录本1;PI3K/Akt  

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更新时间：2022-12-03

血浆suPAR及尿NGAL、KIM-1对成人心脏手术相关性急性肾损伤的早期诊断价值 封面论文 封底论文 增强出版 AI导读

朱龙银, 王海霞, 程伟, 张湖海, 冉玲玉, 龙焕屏, 盛毓秀, 陈丽萍, 赵洪雯

2021, 46(12): 1205-1212. DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2021.12.06

摘要：目的探讨血浆可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)及尿中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)、尿肾脏损伤分子-1(KIM-1)对成人心脏手术相关性急性肾损伤(CSA-AKI)的早期诊断价值。方法采用前瞻性病例对照研究，连续纳入2020年3月—2021年2月在陆军军医大学第一附属医院心脏外科行体外循环心脏手术的患者170例，在术前和术后2 h、2 d、7 d分别留取静脉血及尿液，采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血浆suPAR、尿NGAL、尿KIM-1水平。按术后7 d是否发生AKI分为AKI组(n=34)和非AKI组(n=136)，比较两组血浆suPAR、尿NGAL、尿KIM-1水平的差异；采用logistic回归分析CSA-AKI的危险因素；通过受试者工作特征(ROC)曲线评价血浆suPAR，尿NGAL、尿KIM-1对CSA-AKI的早期诊断价值。结果AKI组血浆suPAR水平明显高于非AKI组(P<0.01)，AKI组术后2 h的尿KIM-1及术后2 h、7 d的尿NGAL水平均明显高于非AKI组(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示，术前、术后2 h血浆suPAR，术后2 h尿KIM-1、NGAL诊断CSA-AKI的曲线下面积(AUC)分别为0.683、0.717、0.643、0.631；联合检测术后2 h血浆suPAR+尿KIM-1+尿NGAL的AUC最大(AUC=0.793，95%CI 0.708~0.879，P<0.001)，敏感度为64.71%，特异度为82.35%。Logistic回归分析结果显示，在校正了性别，术前左室射血分数(LVEF)、白蛋白(ALB)及术后2 h肌酐、估算肾小球滤过率(eGFR)、血尿素氮(BUN)、KIM-1、NGAL后，术后2 h suPAR仍为CSA-AKI的独立危险因素。结论血浆suPAR、尿NGAL、尿KIM-1均可早期诊断CSA-AKI；单独检测时，术后2 h血浆suPAR的诊断效能最佳；联合检测术后2 h血浆suPAR、尿NGAL、尿KIM-1可进一步提高对CSA-AKI的诊断效能。  

关键词：急性肾损伤;心脏手术;可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体;中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白;肾脏损伤分子-1  

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血液嗜碱性粒细胞CD16和CD32在慢性气道炎症性疾病中的表达及其临床意义 封面论文 封底论文 增强出版 AI导读

吴久纯, 耿诗洋, 谷芳秋, 何韶衡, 张慧云, 刘敬禹

2021, 46(12): 1213-1219. DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2021.12.07

摘要：目的探讨血液嗜碱性粒细胞CD16和CD32在哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠(ACO)、慢性阻塞性肺疾病(COPD)中的表达及其临床意义。方法选取2019年12月—2020年12月就诊于锦州医科大学附属第三医院的COPD、ACO患者及招募的健康志愿者作为研究对象，分别设为COPD组、ACO组及健康对照组。收集研究对象的性别、年龄、病史、发病年龄、体重指数(BMI)及吸烟史等一般资料并采集外周静脉血，采用流式细胞仪检测嗜碱性粒细胞富集群中CD16和CD32的表达情况，ELISA法检测血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。结果与健康对照组相比，ACO组、COPD组外周血单个核细胞群中CD16⁺CCR3⁺细胞、CD16⁺CD123⁺HLA-DR^-细胞、CD16⁺CCR3⁺CD123⁺HLA-DR^-细胞比例增高(P<0.05)，COPD组单个核细胞群中CD32⁺CD123⁺HLA-DR^-细胞、CD32⁺CCR3⁺CD123⁺HLA-DR^-细胞比例增高(P=0.003，P=0.030)，ACO组粒细胞群中CD32⁺CD123⁺HLA-DR^-细胞、CD32⁺CCR3⁺CD123⁺HLA-DR^-细胞比例降低(P=0.019，P=0.031)。ACO组粒细胞群中CCR3⁺细胞和CCR3⁺CD123⁺HLA-DR^-细胞的CD32平均荧光强度(MFI)较健康对照组降低(P=0.006，P=0.047)。ACO组血浆TNF-α表达水平较健康对照组升高，差异有统计学意义(P=0.036)。结论嗜碱性粒细胞源CD16和CD32可能在ACO、COPD发病过程中发挥重要作用，TNF-α可能参与了ACO的发病，为后续ACO和COPD的临床治疗提供了新的靶点。  

关键词：哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠;慢性阻塞性肺疾病;嗜碱性粒细胞;CD16;CD32;肿瘤坏死因子-α  

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更新时间：2022-12-03

鼻腔鼻窦肾透明细胞癌5例报告并文献复习 封面论文 封底论文 增强出版 AI导读

刘穹, 贺敬敬, 韩明鲲, 周雪筠, 陈雷, 冯勃, 袁虎

2021, 46(12): 1227-1231. DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2021.12.09

摘要：目的分析鼻腔鼻窦肾透明细胞癌的临床特征及治疗方案，并探讨其治疗策略及预后。方法回顾性分析2005—2020年解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科医学部收治的5例鼻腔鼻窦肾透明细胞癌患者的年龄、性别、发病部位、病程时限等临床特征，探讨其治疗方案及预后，并对相关文献进行复习与总结。结果5例患者均为男性，鼻腔鼻窦肿瘤的发病年龄为49~81岁。5例均伴有反复多量鼻出血，其中1例伴视力下降。发病部位包括上颌窦2例，筛窦和蝶窦1例，筛窦和额窦2例。1例以鼻腔肿瘤为首发症状，全面查体时发现肾癌，后采用B超引导下腹腔灌注及微波消融进行治疗；4例鼻腔肿瘤迟发于肾癌，均在早年进行过肾脏根治性手术。5例患者均行鼻腔鼻窦肿瘤根治性切除，其中3例曾口服靶向药物治疗，1例鼻窦局部曾行放疗，但均无明显效果。截至2020年7月，1例失联，2例死亡，2例带瘤生存。结论鼻腔鼻窦肾透明细胞癌为少见病，以严重鼻出血和周围临近组织器官侵袭受累为主要临床症状，放疗、靶向药物治疗、免疫治疗均无明显效果，鼻腔根治性手术是治疗本病的有效措施，可以缓解临床症状，提高生存质量。  

关键词：鼻腔鼻窦;肾透明细胞癌;鼻内镜手术;肿瘤转移  

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更新时间：2022-12-03

临床研究

生殖因素与女性2型糖尿病发病风险的队列研究 封面论文 封底论文 增强出版 AI导读

郭梦然, 汤旭磊, 车红霞, 关聪会, 赵楠, 傅松波, 刘丽娟, 闵行, 叶月, 许晓双, 甄东户

2021, 46(12): 1196-1204. DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2021.12.05

摘要：目的探讨孕次、产次、流产、哺乳、初潮年龄、绝经年龄、生育年限等生殖因素与女性2型糖尿病(T2DM)发病风险之间的关系。方法采用队列研究REACTION研究中兰州地区的资料，于2011年5月开始对兰州市天庆嘉园社区、张广社区和五泉山社区三个社区年龄为40~75岁的女性居民进行流行病学调查，通过调查问卷确定生殖史、月经史。纳入调查资料完整的7094名女性，其中基线糖耐量正常2963名，随访5年内结局事件T2DM的发生情况；采用logistic回归分析和Cox风险回归模型探讨生殖因素与女性T2DM发病风险的关系。结果较高孕次、产次女性T2DM的发病风险明显增加，尤其是孕次、产次超过3次时，T2DM发病风险增加约1.6倍，且产次对女性T2DM的影响更明显(孕次2、3、≥4次的HR分别为1.08、1.26、1.60，95%CI分别为0.68~1.72、1.07~1.99、1.01~2.45，P=0.000；产次2、3、≥4次的HR分别为1.21、1.60、1.65，95%CI分别为1.08~1.69、1.09~2.78、1.11~2.43，P=0.000)。是否流产并不影响女性T2DM的发病情况，雌激素累积水平(初潮年龄、绝经年龄、生育年限)与女性T2DM也无相关性。哺乳是女性T2DM较好的保护因素，母乳喂养女性T2DM的发病风险降低约30%(HR=0.70，95%CI 0.46~0.96，P=0.001)。结论孕次、产次是女性T2DM的危险因素，随着孕次、产次增加，T2DM发病风险明显增高；而哺乳是女性T2DM的保护因素，可降低女性T2DM的发病风险。  

关键词：糖尿病，2型;孕次;产次;流产;哺乳;女性;队列研究  

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更新时间：2022-12-03

综述

外泌体miRNAs及lncRNAs在乳腺癌中的作用研究进展 封面论文 封底论文 增强出版 AI导读

万雪, 叶婷, 李婧媛, 冯佳, 谢丹, 刘靳波

2021, 46(12): 1245-1250. DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2021.12.12

摘要：外泌体是一种直径为30~150 nm的微囊泡，其内包含蛋白质、脂质、代谢产物、微小RNAs(miRNAs)及长链非编码RNAs(lncRNAs)等活性物质，可通过介导细胞间信息交流、调节肿瘤微环境促进肿瘤的发生发展。miRNAs及lncRNAs是非编码RNAs中重要的组成部分，通过外泌体介导在乳腺癌的发生发展中起重要作用。该文主要总结乳腺癌细胞来源外泌体miRNAs及lncRNAs在乳腺癌进展、微环境及耐药等方面的作用，乳腺癌微环境来源外泌体miRNAs及lncRNAs对乳腺癌发生发展的影响，以及外泌体miRNAs及lncRNAs作为乳腺癌生物标志物的潜力。  

关键词：乳腺癌;外泌体;外泌体微小RNAs;外泌体长链非编码RNAs;肿瘤微环境  

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内质网自噬及其与疾病的关系研究进展 封面论文 封底论文 增强出版 AI导读

张慧芳, 黄自能, 陈蔚, 孙林, 刘伏友, 肖力

2021, 46(12): 1251-1257. DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2021.12.13

摘要：内质网自噬是指细胞通过选择性自噬清除内质网的过程。选择性清除应激的内质网以及内质网腔内过度聚集的蛋白质对于内质网的质量控制及细胞稳态非常重要。多种内质网自噬受体介导了内质网与自噬体的特异性结合，促进内质网片段被溶酶体降解。内质网自噬异常与多种疾病密切相关，因此研究内质网自噬的分子机制具有重要的生理及病理意义。该文对内质网自噬的机制及其与疾病的关系进行了综述。  

关键词：内质网;内质网自噬;内质网自噬受体  

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更新时间：2022-12-03