El objetivo de este estudio es investigar el efecto inhibitorio del péptido antimicrobiano WK-13-3D en las células MDA-MB-231 del cáncer de mama triple negativo y su posible mecanismo. Métodos: Se utilizó el método CCK-8 para investigar el efecto del péptido antimicrobiano WK-13-3D en las concentraciones de 0, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40 μmol/L sobre la proliferación celular de MDA-MB-231; se llevó a cabo un experimento de pull down para determinar la interacción del péptido antimicrobiano WK-13-3D con las proteínas de las células MDA-MB-231. Las células MDA-MB-231 fueron tratadas con 0, 10 y 20 μmol/L de péptido antimicrobiano WK-13-3D o sin él, y luego se realizó el análisis de apoptosis mediante citometría de flujo, y se analizó la expresión de la proteína BiP, la proteína cinasa R-símil a la endorretículum (PERK), el factor de iniciación de la traducción eucariota 2α (eIF2α), eIF2α fosforilada (p-eIF2α) y la proteína Bax mediante la técnica de Western blotting; también se llevó a cabo el análisis de la expresión de las proteínas BiP, PERK, eIF2α, p-eIF2α y Bax por medio de Western blotting en las células MDA-MB-231 en las que se inhibió el péptido antimicrobiano WK-13-3D o se utilizó el vector si-R-592, y en las células en las que se utilizó el vector si-R-592 y el péptido antimicrobiano WK-13-3D en una concentración de 10 μmol/L. Doce ratones BALB/c fueron divididos aleatoriamente en grupos PBS (n=4), TAX (n=4) y WK-13-3D (n=4). A todos los ratones se les inyectaron células MDA-MB-231 para establecer un modelo de trasplante de tumor de cáncer de mama triple negativo. Al grupo WK-13-3D se le inyectó de manera subcutánea el péptido antimicrobiano WK-13-3D en una dosis de 200 mg/(kg*día), al grupo TAX se le inyectó TAX intraperitonealmente en una dosis de 200 mg/(kg*día), al grupo PBS se le inyectó el mismo volumen de PBS. Después de 2 semanas de inyección, los ratones fueron sacrificados, se midió el peso y el volumen del tumor y se tomaron fotografías. Se realizó la prueba de inmunohistoquímica para detectar la expresión de las proteínas BiP y Ki-67 en el tejido tumoral. Resultados: Los resultados del método CCK-8 mostraron que a medida que aumentaba la concentración del péptido antimicrobiano WK-13-3D, la supervivencia de las células MDA-MB-231 disminuía, la concentración inhibitoria media (IC₅₀) fue de 19.82 μmol/L. Durante el experimento de pull down se encontraron 268 interacciones del péptido antimicrobiano con las proteínas de las células MDA-MB-231, las principales incluyeron BiP, proteína de choque térmico 90β1 (HSP90B1), proteína de contención de valosina (VCP), proteína de choque térmico humano de 71 kD (HSPA8), entre otras. En comparación con el grupo de control, el tratamiento de las células MDA-MB-231 con el péptido antimicrobiano WK-13-3D en las concentraciones de 10 y 20 μmol/L resultó en un aumento significativo en el índice de apoptosis (P<0.05 o P<0.01), una disminución significativa en la expresión de la proteína BiP (P<0.05), un aumento significativo en la expresión de las proteínas PERK, p-eIF2α, Bax (P<0.05 o P<0.01), mientras que la expresión de la proteína eIF2α no cambió significativamente (P>0.05). En comparación con el grupo de control, en las células MDA-MB-231 en las que se inhibió el péptido antimicrobiano WK-13-3D o se utilizó el vector si-R-592, se observó una disminución significativa en la expresión de la proteína BiP (P<0.05), un aumento significativo en la expresión de las proteínas PERK, p-eIF2α, Bax (P<0.05 o P<0.01), mientras que la expresión de la proteína eIF2α no cambió significativamente (P>0.05); en comparación con el grupo si-R-592, las células MDA-MB-231 en las que se inhibió el péptido antimicrobiano WK-13-3D y se utilizó el vector si-R-592 mostraron una disminución en la expresión de la proteína BiP (P<0.05), un aumento en la expresión de las proteínas PERK, p-eIF2α, Bax (P<0.05 o P<0.01), mientras que la expresión de la proteína eIF2α no cambió significativamente (P>0.05). Los tumores de los ratones tratados con el péptido antimicrobiano WK-13-3D y TAX tuvieron un volumen significativamente menor que el del grupo PBS (P<0.05), los resultados de la tinción inmunohistoquímica mostraron que después del tratamiento con el péptido antimicrobiano WK-13-3D, la proporción de células positivas de Ki-67 y BiP en el tejido tumoral de los ratones fue significativamente menor que en el grupo PBS (P<0.01). Conclusiones: El péptido antimicrobiano WK-13-3D puede inhibir la proliferación de las células MDA-MB-231, y su mecanismo posiblemente implica la activación del estrés del retículo endoplásmico y la inducción de la apoptosis.

Péptido antimicrobiano; cáncer de mama triple negativo; estrés del retículo endoplásmico; apoptosis