Efecto de la activación de FAM83D en la vía Wnt/β-catenina sobre la autofagia, migración y capacidad invasiva de células de cáncer de mama triple negativo

Liu Xin-Li ,  

Liu Gai-Qin ,  

Yang Ye ,  

Liang Yin ,  

Meng Jin ,  

摘要

El objetivo es investigar el efecto de la activación de FAM83D, miembro de la familia de proteínas con similitud de secuencia 83D, en la vía Wnt/β-catenina sobre la autofagia, migración y capacidad de invasión de las células de cáncer de mama triple negativo (TNBC) y su mecanismo de acción. Métodos: (1) Analizar la expresión de FAM83D en tejidos cancerosos de TNBC basada en la base de datos del Atlas del Genoma del Cáncer (TCGA) y su correlación con la etapa patológica y el pronóstico de los pacientes. (2) Detectar la expresión de FAM83D en líneas celulares de TNBC (MDA-MB-231, MDA-MB-468 y BT549) mediante qRT-PCR. (3) Usar células MDA-MB-231, dividir en grupo NC (transfección con ARN NC), grupo pcDNA 3.1(+) [transfección con plásmido recombinante pcDNA 3.1(+)-FAM83D], grupo siRNA (transfección con siRNA de FAM83D), observar la autofagia celular por método MDC, detectar por Western blot las moléculas relacionadas con la autofagia intracelular (Beclin1, proteína relacionada con la autofagia 5 (ATG5) y proteína asociada a microtúbulos 1A/1B-cadena ligera 3 (LC3)) y moléculas marcador de la vía de señalización Wnt/β-catenina (Wnt3a, miembro de la familia de sitios de integración MMTV sin alas 3a, β-catenina), usar método CCK-8 para detectar la proliferación celular, realizar ensayo de curación de heridas y Transwell para medir la migración e invasión celular. Resultados: La expresión de FAM83D en tejidos cancerosos y líneas celulares TNBC fue significativamente más alta que en tejidos circundantes y células epiteliales mamarias normales humanas (P<0.001), la expresión en tejidos tumorales de pacientes en etapa media y avanzada fue mayor que en pacientes en etapa temprana (P<0.001), y se correlacionó negativamente con el pronóstico de los pacientes (P<0.05). La sobreexpresión del gen FAM83D pudo promover significativamente la proliferación, migración, invasión y autofagia de las células MDA-MB-231 (P<0.05), aumentar la expresión intracelular de proteínas Beclin1, ATG5, Wnt3a, β-catenina y favorecer la conversión de LC3-I en LC3-II (P<0.05). La reducción de la expresión de FAM83D pudo inhibir significativamente la proliferación, migración, invasión y autofagia de las células MDA-MB-231 (P<0.05), al reducir la expresión intracelular de proteínas Beclin1, ATG5, Wnt3a, β-catenina y suprimir la conversión de LC3-I en LC3-II (P<0.05). Conclusión: FAM83D podría promover la autofagia, migración e invasión de las células TNBC mediante la activación de la vía de señalización Wnt/β-catenina.

关键词

cáncer de mama triple negativo;miembro de la familia de proteínas con similitud de secuencia 83D;autofagia;vía Wnt/β-catenina;migración e invasión

阅读全文