El objetivo fue investigar el impacto de la mutación del isocitrato deshidrogenasa 1 (IDH1) en la angiogénesis del glioblastoma, y seleccionar y validar genes diferencialmente expresados relacionados. Métodos Se recopilaron 198 especímenes de glioblastoma tratados en el Hospital General de la Universidad de Medicina de Ningxia, y se utilizó inmunohistoquímica para detectar la tasa de expresión positiva de la mutación IDH1 y factores relacionados con la angiogénesis, como CD34 y el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF). Se utilizó la línea celular de glioblastoma U87 con mutación inducida por doxiciclina como grupo de mutación IDH1, y la línea celular U87 sin inducción como grupo de control; se utilizó qPCR para detectar los niveles de expresión de factores de regulación angiogénica (VEGFA, factor de alta movilidad SRY relacionado 18 (SOX18), etc.) en ambas líneas celulares; se compararon las diferencias en los perfiles de expresión génica entre los dos grupos mediante secuenciación de ARN (RNA-seq), y se analizaron los efectos de los genes diferencialmente expresados en las vías de señalización relacionadas mediante análisis de enriquecimiento de Ontología Génica (GO) y Enciclopedia de Genes y Genomas de Kyoto (KEGG). Se utilizaron Western blotting y qPCR para analizar las diferencias en la expresión de factores relacionados con la angiogénesis (ETS1, VEGFC, etc.). Resultados La inmunohistoquímica mostró que de los 198 especímenes de glioblastoma, 102 (51,5%) fueron positivos para la mutación de IDH1; la tasa de expresión positiva de CD34 y VEGF en los pacientes con mutación de IDH1 fue significativamente mayor (P<0,05). Los resultados de qPCR mostraron que, en comparación con el grupo de control, los niveles de mRNA de genes relacionados con la angiogénesis, como VEGFA, SOX18, proteína morfogenética ósea 6 (BMP6), efrina A2 (EFNA2), miembro de la familia de Wnt1 (WNT1), fueron significativamente mayores en las células U87 del grupo con mutación de IDH1 (P<0,05), mientras que los niveles de expresión de la proteína de intercambio nucleótido de guanina 4 (RAPGEF4) fueron significativamente más bajos (P<0,05). Los resultados del análisis de transcripción mostraron que la mutación de IDH1 afecta la vía de angiogénesis mediante regulación epigenética. Los resultados de Western blotting y qPCR mostraron que los niveles de expresión de proteínas y mRNA de factores de angiogénesis (ETS1, proteína de unión GATA 2/3, VEGFC, receptor alfa del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFRA)) en las células U87 con mutación de IDH1 fueron significativamente mayores que en las del grupo de control (P<0,05). Conclusión La mutación de IDH1 aumenta significativamente los niveles de transcripción y la expresión de proteínas de genes relacionados con la angiogénesis (ETS1, VEGFC, BMP6, SOX18, etc.) en las células de glioblastoma, promoviendo así la angiogénesis. Este proceso puede implicar la interacción sinérgica entre las células endoteliales, las células de fibroblastos y la matriz extracelular en el microambiente tumoral.

mutación de IDH1; glioblastoma; angiogénesis patológica; secuenciación de ARN