Objetivo Investigar el efecto y el mecanismo potencial de la metilación m⁶A inducida por la proteína del dominio asociado a la ubiquitina 2 (UBAC2) en la invasión y migración de las células del cáncer colorrectal. Métodos Análisis de la base de datos GEPIA2.0 para determinar las diferencias de expresión del ARNm de UBAC2 en los tejidos cancerosos colorrectales en comparación con los tejidos normales adyacentes, así como su expresión en los tejidos cancerosos colorrectales en diferentes etapas, y análisis de la correlación entre la proteína asociada al tumor de Wilms 1 (WTAP) y la expresión de UBAC2. Uso de la herramienta en línea Kaplan-Meier plotter para analizar la correlación entre UBAC2 y la tasa de supervivencia global de pacientes con cáncer colorrectal. Predicción de los sitios potenciales de metilación m⁶A en el gen UBAC2 utilizando las bases de datos RMVar y SRAMP. Detección de los niveles de expresión del ARNm y la proteína de UBAC2 en linajes celulares de cáncer colorrectal mediante qRT-PCR y Western blotting respectivamente. Las células SW480 se usaron para el experimento de represión de UBAC2, con un grupo de control (sin tratamiento), un grupo sh-NC (transfección con un plásmido de control negativo sh-NC) y un grupo sh-UBAC2 (transfección con un plásmido sh-UBAC2) ; también se realizó el experimento de represión de WTAP, con un grupo de control (sin tratamiento), un grupo si-NC (transfección con un siARN de control negativo) y un grupo si-WTAP (transfección con un siARN de interferencia WTAP) ; se realizó el experimento de sobreexpresión de UBAC2, con un grupo de control (sin tratamiento), un grupo si-WTAP (transfección con un plásmido vacío pcDNA3.1) y un grupo si-WTAP+OE-UBAC2 (transfección con un plásmido de sobreexpresión de UBAC2 pcDNA3.1-UBAC2). Los niveles de expresión de las proteínas UBAC2, WTAP, E-cadherina, N-cadherina y Vimentina se determinaron mediante Western blotting ; los niveles de expresión del ARNm de UBAC2 se midieron mediante qRT-PCR ; las capacidades de invasión y migración celular se evaluaron mediante Transwell. Los niveles de metilación m⁶A del ARNm de UBAC2 se midieron mediante MeRIP-qPCR ; el experimento RIP-qPCR validó la unión entre WTAP y el ARNm de UBAC2. Se realizó un experimento de metástasis pulmonar en ratones desnudos, con un grupo LV-sh-NC (inyección intravenosa de células SW480 infectadas de forma estable con LV-sh-NC) y un grupo LV-sh-UBAC2 (inyección intravenosa de células SW480 infectadas de forma estable con LV-sh-UBAC2). Tras 42 días de crecimiento tumoral, una parte de los tejidos pulmonares se coloreó con hematoxilina y eosina (HE) y otra se utilizó para medir los niveles de expresión del ARNm de Luc2 mediante qRT-PCR. Resultados El análisis de la base de datos GEPIA2.0 mostró que los niveles de expresión del ARNm de UBAC2 en los tejidos cancerosos colorrectales eran significativamente más altos que en los tejidos normales adyacentes, y aumentaban gradualmente con la progresión de la etapa tumoral (P<0,05). Los niveles de expresión del ARNm y la proteína de UBAC2 fueron significativamente más altos en varias líneas celulares del cáncer colorrectal que en las células epiteliales normales del colon (P<0,05). En comparación con el grupo sh-NC, se observó un aumento significativo en los niveles de E-cadherina y una disminución significativa en los niveles de N-cadherina y Vimentina en las células SW480 del grupo sh-UBAC2, acompañado por una notable reducción en su capacidad de invasión y migración (P<0,05). Según el análisis de la base de datos GEPIA 2.0, hubo una correlación positiva entre WTAP y UBAC2 (r=0,24, P<0,001). En comparación con el grupo si-NC, el grupo si-WTAP mostró una disminución significativa en los niveles de expresión de WTAP, UBAC2 a nivel de ARNm y proteína (P<0,05). Los resultados del experimento MeRIP-qPCR mostraron una disminución significativa en el nivel de metilación m⁶A del ARNm de UBAC2 en el grupo si-WTAP en comparación con el grupo si-NC (P<0,05). El experimento RIP-qPCR confirmó la unión entre WTAP y el ARNm de UBAC2. En comparación con el grupo de control, se observó un aumento significativo en los niveles de E-cadherina y una disminución significativa en los niveles de N-cadherina y Vimentina en las células SW480 del grupo si-WTAP (P<0,05) ; en comparación con el grupo si-WTAP, se observó una disminución significativa en los niveles de E-cadherina y un aumento significativo en los niveles de N-cadherina y Vimentina en las células SW480 del grupo si-WTAP+OE-UBAC2 (P<0,05). El número de nódulos pulmonares observados en ratones desnudos del grupo LV-sh-UBAC2 fue significativamente menor que en el grupo LV-sh-NC, y los niveles de expresión del ARNm de Luc2 en los tejidos pulmonares fueron significativamente más bajos que en el grupo LV-sh-NC (P<0,05). Conclusión La metilación m⁶A inducida por UBAC2 puede regular el proceso de transición epitelio-mesénquima (EMT) en las células del cáncer colorrectal, y en consecuencia influir en su capacidad de invasión y migración.

Cáncer colorrectal ; proteína asociada a UBAC2 ; metilación m⁶A ; proteína asociada al tumor de Wilms 1 ; invasión ; migración