El objetivo es investigar el efecto protector de los compuestos secretados de las células madre mesenquimales (MSC) cultivadas en 3D en los neuronas del hipocampo de ratones sometidos a inmersión en agua de mar (SW) asociada con lesión por estiramiento (SI), ofreciendo así una nueva perspectiva para la reparación neuronal después de una lesión cerebral traumática (TBI) asociada a SW. El método utiliza el cultivo en suspensión de MSC y recoge el medio de cultivo (CM) que contiene los compuestos secretados de las MSC. Se establece un modelo celular de SW y SI con neuronas de hipocampo de ratón (células HT22). Las células HT22 se dividen en grupo de control, grupo SI, grupo SI+SW, grupo SI+CM y grupo SI+SW+CM. La viabilidad celular de cada grupo se mide mediante el método CCK-8, la tasa de apoptosis celular se mide mediante citometría de flujo, la capacidad de migración celular se mide mediante un ensayo de raspadura celular, y los niveles de expresión de las proteínas relacionadas con la apoptosis Bcl-2, Bax, ACSL4 y COX-2 se miden mediante Western blot. Los resultados muestran una disminución significativa de la viabilidad de las células HT22 después de una inmersión en agua de mar al 15% durante 12 horas (P<0,05). Los resultados del método CCK-8 muestran una disminución significativa de la viabilidad de las células HT22 en los grupos SI y SI+SW, en comparación con el grupo de control (P<0,0001). Después del tratamiento con el CM que contiene los compuestos secretados de las MSC, la viabilidad de las células del grupo SI+CM es significativamente mayor que la del grupo SI (P<0,0001), y la viabilidad de las células del grupo SI+SW+CM es significativamente mayor que la del grupo SI+SW (P<0,001). Los resultados de citometría de flujo muestran una tasa de apoptosis significativamente mayor en los grupos SI y SI+SW que en el grupo de control (P<0,05 o P<0,001), mientras que la tasa de apoptosis en el grupo SI+CM es significativamente más baja que en el grupo SI (P<0,05), y la tasa de apoptosis en el grupo SI+SW+CM es significativamente más baja que en el grupo SI+SW (P<0,05). Los resultados de Western blot muestran que en comparación con el grupo de control, la expresión de Bcl-2 es significativamente reducida en los grupos SI y SI+SW (P<0,01 o P<0,0001), y la expresión de Bax, ACSL4 y COX-2 es significativamente aumentada (P<0,01 o P<0,001 o P<0,0001); en comparación con el grupo SI, la expresión de la proteína Bcl-2 es significativamente aumentada en el grupo SI+CM (P<0,05), mientras que la expresión de Bax, ACSL4 y COX-2 es significativamente reducida (P<0,05); en comparación con el grupo SI+SW, la expresión de Bcl-2 es significativamente aumentada en el grupo SI+SW+CM (P<0,01), y la expresión de Bax, ACSL4 y COX-2 es significativamente reducida (P<0,01 o P<0,001). Los resultados del ensayo de raspadura celular muestran que las tasas de migración celular de los grupos SI y SI+SW son significativamente menores que las del grupo de control a las 12 y 24 horas (P<0,01 o P<0,0001), mientras que la tasa de migración celular del grupo SI+CM es significativamente mayor que la del grupo SI (P<0,0001 o P<0,01), y la tasa de migración celular del grupo SI+SW+CM es significativamente mayor que la del grupo SI+SW (P<0,0001). Conclusión: Los compuestos secretados de las MSC cultivadas en suspensión pueden atenuar las lesiones neuronales asociadas a una inmersión en agua de mar y una lesión por estiramiento, y podrían convertirse en un tratamiento potencial para los TBI asociados con SW.

células madre mesenquimales;compuestos secretados;inmersión en agua de mar;lesión cerebral traumática