El efecto del trasplante de microbiota en la diarrea relacionada con la quimioterapia en ratones

Yang Qiu-Yu ,  

Tan Meng-Tian ,  

Bai Jing ,  

Ren Xing ,  

Zhang Jun-Qi ,  

Yang Yong ,  

Sun Yu-Hang ,  

Li Lei ,  

Fu Ze-Xian ,  

摘要

El objetivo de este estudio fue explorar el efecto del trasplante fecal (FMT) en la diarrea relacionada con la quimioterapia (CID) en ratones. Métodos 15 ratones C57BL/6N se distribuyeron al azar en tres grupos: grupo de control en blanco, grupo modelo CID y grupo CID + FMT, cada uno con 5 ratones. El grupo de control en blanco no recibió intervención alguna, y sus heces se usaron para hacer una suspensión de bacterias fecales; el grupo modelo CID recibió una inyección intraperitoneal de fluorouracilo (65 mg/kg) durante 5 días consecutivos para inducir un modelo murino de CID, seguido de una infusión gástrica de 0,1 ml de solución salina cada dos días; el grupo CID + FMT recibió una infusión gástrica de 0,1 ml de suspensión de bacterias fecales cada dos días y, después de 7 días de intervención, se indujo un modelo murino de CID inyectando fluoro-uracilo (65 mg/kg) intraperitoneal durante 5 días consecutivos y el experimento terminó el día 14. Se registró la ingesta de alimentos y el peso corporal de los ratones durante el experimento, y al final del experimento, los ratones fueron sacrificados bajo anestesia por CO2 profundo, y se recogieron muestras del tracto digestivo desde el ano hasta el ciego para una tinción de Hematoxilina y Eosina y una observación histológica, se recogieron muestras de heces para el secuenciación del gen 16S rRNA, y se realizó un análisis de diversidad de especies alfa de bacterias intestinales en los diferentes grupos de ratones utilizando los índices de Shannon, Simpson y Chao1, y se examinaron las diferencias entre grupos de la composición de especies de bacterias intestinales mediante un análisis de similitudes (Anosim), y se utilizó el tamaño del efecto del análisis lineal discriminante (LEfSe) y el análisis multidimensional no métrico (NMDS) para analizar las comunidades bacterianas intestinales dominantes de los diferentes grupos de ratones y sus relaciones de clasificación similares. Resultados La longitud del tracto digestivo de los ratones del grupo modelo CID fue significativamente más corta que la del grupo de control en blanco ( P <0,05), y la diferencia en la longitud del tracto digestivo entre el grupo CID + FMT y el grupo modelo CID no fue estadísticamente significativa ( P > 0,05). El peso de los ratones del grupo modelo CID disminuyó un 42,04 %, mientras que el del grupo de control en blanco aumentó un 10,24 %, con una diferencia estadísticamente significativa entre los dos grupos ( P < 0,05) ; el peso de los ratones del grupo CID + FMT disminuyó un 8,12 %, y la pérdida de peso fue significativamente atenuada en comparación con la de los ratones del grupo modelo CID, con una diferencia estadísticamente significativa ( P < 0,05). Los resultados de la tinción con HE mostraron que en comparación con el grupo de control en blanco, la mucosa intestinal del grupo modelo CID estaba más dañada, con atrofia y deformación, y una infiltración de células inflamatorias, y un puntaje histológico más alto ( P < 0,05) ; en comparación con el grupo modelo CID, la integridad de la mucosa intestinal del grupo CID + FMT se había mejorado ligeramente, con lesiones menos graves, y la diferencia en el puntaje histológico no fue estadísticamente significativa ( P > 0,05). Los resultados del análisis de diversidad alfa de las comunidades bacterianas mostraron que los índices de Shannon, Simpson y Chao1 de los tres grupos fueron estadísticamente significativos ( P < 0,05). Los resultados del análisis de similitud Anosim y del análisis NMDS mostraron que en comparación con el grupo modelo CID, la comunidad bacteriana intestinal del grupo CID + FMT estaba más cerca de la del intestino normal. Los resultados del análisis LEfSe mostraron que la comunidad bacteriana intestinal de los ratones del grupo modelo CID estaba enriquecida en f_ Bacteroidaceae (predominio de Bacteroides), mientras que la comunidad bacteriana intestinal de los ratones del grupo CID + FMT era similar a la del grupo de control en blanco, con predominio de f_ Enterobacteriaceae (predominio de enterobacterias). Conclusión El FMT del mismo género puede restaurar la abundancia de las comunidades bacterianas intestinales de los ratones CID, haciéndolas más cercanas a las comunidades bacterianas intestinales normales, protegiendo así la mucosa intestinal, reduciendo las lesiones y atenuando la gravedad de la CID.

关键词

trasplante de microbiota; diarrea relacionada con la quimioterapia; microbiota intestinal; secuenciación de alta velocidad

阅读全文