Целью исследования было изучить защитное действие полипрузина на повреждение функции кишечного барьера тонкой кишки у мышей после воздействия пониженного давления и гипоксии. Методика: использовали 32 самца мышей C57BL/6J возрастом 8 недель, случайным образом разделенных на четыре группы: контрольная, группа с обработкой полипрузином (PZ), группа с пониженным давлением и гипоксией (HH) и группа с пониженным давлением и гипоксией + полипрузин (HH+PZ) (n=8). В течение недели каждую группу кормили полипрузином (100 мг/кг) или дистиллированной водой (0,2 мл) внутрь, затем группы HH и HH+PZ подвергались имитации условий низкого давления и гипоксии на высоте 6000 м в течение недели, при этом ежедневно продолжали давать полипрузин или воду. Измеряли изменение длины тонкой кишки у мышей, оценивали повреждение ворсинок слизистой кишечника с помощью окрашивания гематоксилином и эозином, определяли экспрессию окклюдина и клаудина-1 методом Western blot. Методом ELISA измеряли уровни липополисахарида (LPS), D-молочной кислоты (D-LA), интерлейкина-6 (IL-6), малонового диальдегида (MDA), глутатионпероксидазы (GPX) в сыворотке; иммуногистохимия и иммунофлуоресценция оценивали количество кишечных стволовых клеток, пролиферирующих клеток и клеток Панета; окрашивание TUNEL выявляло апоптоз эпителиальных клеток кишечника. Результаты: по сравнению с контрольной группой у мышей группы HH значительно снизилась масса тела и длина тонкой кишки (P<0.05); наблюдалось атрофическое уплощение ворсинок, значительное снижение высоты ворсинок и отношения высоты ворсинок к глубине крипты (V/C) (P<0.05, P<0.01); снижена экспрессия окклюдина и клаудина-1 в тощей и подвздошной кишках (P<0.05); повышены уровни LPS, D-LA, IL-6, MDA в сыворотке, снизился уровень GPX (P<0.05); уменьшилось количество кишечных стволовых клеток и пролиферирующих клеток, увеличился апоптоз, уменьшилась доля клеток Панета (P<0.05). По сравнению с группой HH интервенция полипрузином замедляла снижение массы тела, significativamente увеличивала длину тонкой кишки (P<0.05); улучшала повреждение ворсинок, повышала высоту ворсинок и V/C (P<0.05); увеличивала экспрессию окклюдина и клаудина-1 (P<0.05); снижала уровни LPS и D-LA (P<0.05), значительно повышала уровни GPX (P<0.05); увеличивала количество кишечных стволовых клеток, стимулировала клеточную пролиферацию, подавляла апоптоз (P<0.05), повышала долю клеток Панета (P<0.05). Заключение: полипрузин, возможно, активирует кишечные стволовые клетки, стимулирует пролиферацию эпителиальных клеток слизистой тонкой кишки, подавляет их апоптоз, повышает уровень плотных соединительных белков и снижает повреждение слизистой тонкой кишки у мышей при воздействии пониженного давления и гипоксии.
关键词
пониженное давление и гипоксия; повреждение слизистой кишечника; полипрузин; кишечные стволовые клетки