Целью является изучение влияния миР-185-5p на пролиферацию, миграцию и автофагическую способность клеток легочной аденокарциномы путем негативной регуляции белка 1 суперсемейства почти 9 (TM9SF1). Методы: набор данных GSE51853 был загружен из базы данных комплексной экспрессии генов (GEO), и было проанализировано выражение миР-185-5p в тканях легочной аденокарциномы. Сайты miR-185-5p, которые связываются с предсказанными белками, были предсказаны с использованием онлайн-базы данных miRTargetLink, miRTarbase и DIANA-microT-CD, и связанные белки автофагии были скачаны с сайта HADb. Затем результаты, полученные из 4 баз данных, были объединены, и выживаемость VEGFA и TM9SF1 была проанализирована с использованием базы данных StarBase. Клетки HEK-293T были смешаны с контрольной плазмидой миР-185-5p или плазмидой миР-185-5p с избытком и с УТР 3' таргета TM9SF1 или мутацией УТР 3' таргета TM9SF1. Экспрессия белка TM9SF1 в клетках A549 была определена с использованием Western blotting после трансфекции перебора материала миР-185-5p. Клетки A549 были разделены на 3 группы: (1) Группа CON + NC, которая трансфектирована контрольными плазмидами миР-185-5p и контрольными плазмидами TM9SF1; (2) Группа over-miR-185-5p + NC, которую трансфектировали плазмидой миР-185-5p с избытком и контрольными плазмидами TM9SF1; (3) Группа over-миR-185-5p + over-TM9SF1, которую трансфектировали плазмидой миР-185-5p с избытком и плазмидой TM9SF1 с избытком. Эффективность пролиферации клеток, заживление ран и миграция клеток были проверены с использованием эксперимента с усилением продукции клеток, испытания накосов и испытанием Transwell, чтобы проверить влияние миР-185-5p на пролиферацию и миграцию клеток легочной аденокарциномы, которые являются целью негативной регуляции TM9SF1. Улучшалось ли автофаговая способность клеток A549 под воздействием mIR-185-5p было выявлено с использованием автофагической строения stubRFP-sensGFP-LC3, и изменение потенциала митохондриальной мембраны (MMP) клеток A549 было определено с использованием эксперимента JC-1. Резюме: в наборе данных GSE51853 уровень экспрессии mIR-185-5p в тканях легочной аденокарциномы значительно ниже, чем в нормальных тканях легких (P<0.01). Результаты qRT-PCR показали, что уровень экспрессии mIR-185-5p в клетках легочной аденокарциномы NCI-H1299 и A549 значительно ниже, чем в нормальных эпителиальных клетках легких BEAS-2B (P<0.01). Полученные результаты предсказывают, что mIR-185-5p может регулировать связанный с автофагией белки TM9SF1. Результаты двойного эксперимента с усилением продукции клеток и Western blotting показали, что mIR-185-5p может прямо связываться с э/мРНК 3'UTR TM9SF1, и после избытка экспрессии mIR-185-5p уровень выразившегося белка-мишени TM9SF1 снижается (P<0,05). Результаты эксперимента с усилением продукции клеток, испытания накосов и испытания Transwell показали, что избыток экспрессии mIR-185-5p может подавлять пролиферацию клеток и их способность к миграции, а избыток экспрессии TM9SF1 может ослабить ингибирующее воздействие mIR-185-5p на пролиферацию и миграцию клеток легочной аденокарциномы (P<0,05). Результаты эксперимента с усилением продукции клеток stubRFP-sensGFP-LC3 показали, что под действием избытка экспрессии mIR-185-5p скорость автофагии клеток A549 увеличивается, но одновременно с избытком экспрессии mIR-185-5p и TM9SF1 скорость автофагии клеток A549 замедляется; результаты эксперимента JC-1 показали, что под воздействием избытка экспрессии mIР-185-5p уровень MMP в клетках A549 снижается, но одновременно с избытком экспрессии mIR-185-5p и TM9SF1 уровень MMP в клетках A549 повышается. Вывод: mIR-185-5p, вероятно, влияет на пролиферацию, миграцию и автофагические способности клеток легочной аденокарциномы через негативную регуляцию экспрессии TM9SF1.

lung adenocarcinoma;miR-185-5p;transmembrane 9 superfamily protein 1;proliferation;migration;autophagy