Целью является исследование влияния подавления экспрессии члена семейства растворимых транспортеров 31 (SLC31A1) на патогенез алкогольной жировой болезни печени (AFLD) у мышей через регуляцию медного гомеостаза и изучение механизма. Метод: 30 здоровых самцов мышей C57BL/6N в возрасте 6–8 недель случайным образом разделены на три группы по 10 особей: контрольная группа, этанольная группа и группа с плазмидой. Контрольная группа ежедневно получала контрольный жидкий рацион, этанольная и плазмидная группы — жидкий рацион с этанолом. Группа с плазмидой получала гидродинамическим методом через хвостовую вену 0,2 мл плазмиды SLC31A1-sgRNA (2 мг/кг), этанольная и контрольная группы получали инъекции физиологического раствора эквивалентного объема. По окончании 8 недель после забора крови из глазных яблок мыши были усыплены, и был взят печеночный материал. В печени определяли уровни mRNA и белка SLC31A1 с помощью количественной ПЦР (qPCR) и вестерн-блоттинга, экспрессию SLC31A1 методом иммуногистохимии (IHC), содержание меди в печени и сыворотке методом колориметрии. Активность супероксиддисмутазы (SOD), содержание глутатиона (GSH), малонового диальдегида (MDA), общего холестерина (TC) и триглицеридов (TG) в печени определяли микрообъемным методом. Активность АЛТ, АСТ, содержание TC и TG в сыворотке определяли биохимическими методами. Гистологические изменения печени оценивали с помощью гематоксилин-эозин (HE), окрашивания по Оил-Ред О и ПАС для выявления повреждений, накопления жира и гликогена. Уровни белков Nrf2, CYP2E1, AMPKα1, PPAR-α, NF-κB p65, IκB-α, JNK и p38 MAPK определяли вестерн-блоттингом. Результаты: плазмида SLC31A1-sgRNA эффективно подавляет экспрессию SLC31A1 (P < 0.001). В сравнении с контролем в этанольной группе увеличились баллы повреждения печени и доля площади липидных капель, снизилась доля площади коллагена (P < 0.01 или P < 0.001); увеличилась доля площади, положительной по SLC31A1, уровни mRNA и белка SLC31A1, содержание меди в печени и сыворотке (P < 0.001); повысилась активность ALT, AST и содержание MDA, TC, TG (P < 0.01 или P < 0.001), снизились активность SOD и уровень GSH (P < 0.05 или P < 0.001); повышался уровень белка CYP2E1 и соотношения p-JNK/JNK, p-p38 MAPK/p38 MAPK, p-NF-κB p65/NF-κB p65 и p-IκB-α/IκB-α (P < 0.05 или P < 0.001), снижались уровни белков Nrf2, PPAR-α и соотношения p-AMPKα1/AMPKα1 (P < 0.05 или P < 0.01). По сравнению с этанольной группой в группе с плазмидой снизились баллы повреждения печени и доля площади липидных капель, повысилась доля площади коллагена (P < 0.01 или P < 0.001); снизились доля площади, положительной по SLC31A1, уровни mRNA и белка SLC31A1, содержание меди в печени и сыворотке (P < 0.001); снизилась активность ALT, AST и содержание MDA, TC, TG (P < 0.05 или P < 0.01 или P < 0.001), повысились активность SOD и уровень GSH (P < 0.05 или P < 0.001); снизились уровень белка CYP2E1 и соотношения p-JNK/JNK, p-p38 MAPK/p38 MAPK, p-NF-κB p65/NF-κB p65 и p-IκB-α/IκB-α (P < 0.05 или P < 0.01 или P < 0.001), повысились уровни белков Nrf2, PPAR-α и соотношения p-AMPKα1/AMPKα1 (P < 0.05 или P < 0.01). Заключение: подавление SLC31A1 может облегчить окислительный стресс, нарушение липидного обмена и воспалительное повреждение у мышей AFLD за счет снижения содержания меди, тем самым облегчая алкогольную жировую болезнь печени.

алкогольная жировая болезнь печени;член семейства растворимых транспортеров 31;медь;окислительный стресс;липидный обмен;воспалительное повреждение