Цель данного исследования - рассмотреть роль компонентов экстратов, выделенных из трехмерно культивируемых мезенхимальных стволовых клеток (MSCs), в защите нейронов гиппокампа мышей при океаническом погружении (SW) с сопровождающимся растяжением, для предоставления нового подхода к восстановлению нейронов после черепно-мозговой травмы (TBI), вызванной сочетанием океанического погружения и растяжения. MSCs выращивали методом плавающей культуры, после чего собирали культуральную жидкость (CM) с компонентами, выделенными из MSCs. Была установлена модель SW + SI клеток нейронов мышей (HT22 cells). Клетки HT22 были произвольно разделены на контрольную группу, группу SI, группу SI+SW, группу SI+CM и группу SI+SW+CM. Для оценки жизнеспособности клеток в каждой группе использовали метод CCK-8, для измерения уровня апоптоза использовали поточечный анализ, для изучения способности клеток к миграции использовали метод клеточного ранения, для определения уровня экспрессии белков, связанных с апоптозом, таких как Bcl-2, Bax, ACSL4, COX-2, применяли метод Western blotting. Результаты показали, что жизнеспособность клеток HT22 значительно снизилась (P<0.05) после 12-часового погружения в 15% океаническое раствор. Результаты теста CCK-8 показали, что после обработки 12 часов жизнеспособность клеток HT22 у групп SI и SI+SW значительно снизилась (P<0.0001) по сравнению с контрольной группой. После обработки клеток компонентами, выделенными из MSCs, жизнеспособность клеток в группе SI+CM значительно увеличилась по сравнению с группой SI (P<0.0001), и жизнеспособность клеток в группе SI+SW+CM значительно увеличилась по сравнению с группой SI+SW (P<0.001). Результаты поточечного анализа показали, что уровень апоптоза клеток в группах SI и SI+SW значительно выше по сравнению с контрольной группой (P<0.05 или P<0.001), в то время как уровень апоптоза в группе SI+CM заметно ниже по сравнению с группой SI (P<0.05), и уровень апоптоза в группе SI+SW+CM заметно ниже по сравнению с группой SI+SW (P<0.05). Результаты теста Western blotting показали, что уровень экспрессии белка Bcl-2 значительно снизился (P<0.01 или P<0.0001) в группах SI и SI+SW по сравнению с контрольной группой, и уровень экспрессии белков Bax, ACSL4 и COX-2 значительно возрос (P<0.01 или P<0.001 или P<0.0001). По сравнению с группой SI, уровень экспрессии белка Bcl-2 в группе SI+CM заметно возрос (P<0.05), а уровень экспрессии белков Bax, ACSL4 и COX-2 заметно снизился (P<0.05); по сравнению с группой SI+SW, уровень экспрессии белка Bcl-2 в группе SI+SW+CM заметно возрос (P<0.01), а уровень экспрессии белков Bax, ACSL4 и COX-2 заметно снизился (P<0.01 или P<0.001). Результаты теста клеточного ранения показали, что через 12 и 24 часа миграция клеток в группах SI и SI+SW значительно снизилась по сравнению с контрольной группой (P<0.01 или P<0.0001), в то время как миграция клеток в группе SI+CM заметно возросла по сравнению с группой SI (P<0.0001 или P<0.01), и миграция клеток в группе SI+SW+CM заметно возросла по сравнению с группой SI+SW (P<0.0001). Это исследование показало, что компоненты экстратов, выделенных из MSCs, выращенных методом плавающей культуры, могут смягчить вред, наносимый океаническим погружением с растяжением нейронов, и могут стать потенциальным методом терапии для сочетанной черепно-мозговой травмы (TBI).

мезенхимальные стволовые клетки; экстракты; океаническое погружение; черепно-мозговая травма