Цель исследования заключается в изучении роли пролина 1 в клетках рака шейки матки в стимуляции стволовых свойств опухоли и индукции эпителиально-мезенхимального перехода (EMT) и молекулярного механизма. Были выбраны клеточные линии рака шейки матки Siha (плоскоклеточный рак) и Hela (железистый рак), и были созданы стабильные клеточные линии с низкой экспрессией пролина 1 с использованием техники медленного вирусного трансфекции. Они были разделены на 3 группы в соответствии с различным обработкой: группа снижения экспрессии 1 (shPin1-1), група снижения экспрессии 2 (shPin1-2) и контрольная группа (shPin1-NON). Для анализа экспрессии генов микром больничных зон (SOX2), альдегид-дегидрогеназы 1A1 (ALDH1A1) и клеточной адгезионной молекулы 44 (CD44) в клетках рака шейки матки после снижения экспрессии пролина 1 использовали qRT-PCR и Western blotting. Для индукции клеток рака шейки матки с образованием сфер без сыворотки использовали qRT-PCR и Western blotting для проверки экспрессии генов SOX2, ALDH1A1, CD44 для верификации. Тест на образование сфер использовали для анализа образования клеточных шаров клеток рака шейки матки после снижения экспрессии пролина 1, тест Transwell для анализа способности к миграции и инвазии клеток различных групп, qRT-PCR и Western blotting для анализа реакции экспрессии белков E-кадгерин (E-cadherin), N-кадгерин (N-cadherin) и активирующего белка 1 (AP-1) транскрипционно-комплексного ключевого белка (c-Jun, c-Fos) в клетках различных групп. Использовали иммунофлюоресцентное сочетание сопряженной иммунного осадка для проверки взаимодействия пролина 1 с c-Jun и совместного местонахождения. Было установлено, что клетки Siha и Hela после снижения пролина 1, уровни экспрессии микром 1, SOX2, ALDH1A1, CD44 мРНК и белка значительно ниже в shPin1.

рак шейки матки; раковые стволовые клетки; NIMA взаимодействие пептидилпролилизомераза; эпителиально-мезенхимальный переход