O objetivo é investigar o efeito e o mecanismo da inibição da expressão do membro 1 da família de transportadores de soluto 31 (SLC31A1) através da regulação da homeostase do cobre nas lesões de fígado gorduroso alcoólico (AFLD) em camundongos. Métodos: 30 camundongos machos saudáveis C57BL/6N com idades entre 6 e 8 semanas foram divididos aleatoriamente em três grupos de 10: grupo controle, grupo etanol e grupo plasmídeo. O grupo controle foi alimentado diariamente com dieta líquida de controle, enquanto os grupos etanol e plasmídeo foram alimentados diariamente com dieta líquida contendo etanol. O grupo plasmídeo recebeu uma injeção hidrodinâmica via veia da cauda de 0,2 ml do plasmídeo SLC31A1-sgRNA (2 mg/kg), enquanto os grupos etanol e controle receberam injeções de volume equivalente de solução salina fisiológica via veia da cauda. Após 8 semanas, o sangue foi coletado por punção ocular, os camundongos foram sacrificados e os fígados foram coletados. A expressão de mRNA e proteína SLC31A1 no tecido hepático foi detectada por PCR quantitativa em tempo real (qPCR) e Western blotting, a expressão de SLC31A1 no tecido hepático foi avaliada por imunohistoquímica (IHC) e o teor de cobre no tecido hepático e soro foi medido por método colorimétrico. A atividade da superóxido dismutase (SOD), o conteúdo de glutationa (GSH), malondialdeído (MDA), colesterol total (TC) e triglicerídeos (TG) no tecido hepático foram medidos pelo método de microplaca, assim como a atividade de alanina aminotransferase (ALT), aspartato aminotransferase (AST), e os conteúdos de TC e TG no soro. As alterações nas lesões hepáticas, acumulação de gordura e glicogênio foram avaliadas por coloração de hematoxilina e eosina (HE), coloração com Oil Red O e coloração Schiff por ácido periódico (PAS), respectivamente. Os níveis proteicos de Nrf2, CYP2E1, AMPKα1, PPAR-α, NF-κB p65, IκB-α, JNK e p38 MAPK no tecido hepático foram avaliados por Western blotting. Resultados: O plasmídeo SLC31A1-sgRNA inibiu efetivamente a expressão de SLC31A1 (P < 0,001). Em comparação com o grupo controle, o escore de lesão hepática e a proporção da área de gotas lipídicas aumentaram no grupo etanol, enquanto a proporção da área de colágeno diminuiu (P < 0,01 ou P < 0,001); a proporção da área positiva para SLC31A1, os níveis de mRNA e proteína de SLC31A1 e o teor de cobre no tecido hepático e soro aumentaram (P < 0,001); as atividades de ALT, AST e os níveis de MDA, TC, TG aumentaram (P < 0,01 ou P < 0,001), enquanto a atividade de SOD e o conteúdo de GSH diminuíram (P < 0,05 ou P < 0,001); os níveis de proteína CYP2E1 e as razões p-JNK/JNK, p-p38 MAPK/p38 MAPK, p-NF-κB p65/NF-κB p65 e p-IκB-α/IκB-α aumentaram (P < 0,05 ou P < 0,001), enquanto os níveis de Nrf2, PPAR-α e a razão p-AMPKα1/AMPKα1 diminuíram (P < 0,05 ou P < 0,01). Em comparação com o grupo etanol, o grupo plasmídeo teve escore de lesão hepática e proporção da área de gotas lipídicas reduzidos, e proporção da área de colágeno aumentada (P < 0,01 ou P < 0,001); proporção da área positiva para SLC31A1, níveis de mRNA e proteína de SLC31A1 e teor de cobre no tecido hepático e soro diminuíram (P < 0,001); atividades de ALT, AST e níveis de MDA, TC, TG diminuíram (P < 0,05 ou P < 0,01 ou P < 0,001), enquanto a atividade de SOD e conteúdo de GSH aumentaram (P < 0,05 ou P < 0,001); níveis de proteína CYP2E1 e razões p-JNK/JNK, p-p38 MAPK/p38 MAPK, p-NF-κB p65/NF-κB p65 e p-IκB-α/IκB-α diminuíram (P < 0,05 ou P < 0,01 ou P < 0,001), enquanto os níveis de Nrf2, PPAR-α e a razão p-AMPKα1/AMPKα1 aumentaram (P < 0,05 ou P < 0,01). Conclusão: A inibição de SLC31A1 pode aliviar o dano por estresse oxidativo, a disfunção do metabolismo lipídico e o dano inflamatório em camundongos AFLD por meio da redução do teor de cobre, aliviando assim as lesões por fígado gorduroso induzidas pelo etanol.

fígado gorduroso alcoólico;membro da família de transportadores de soluto 31;cobre;estresse oxidativo;metabolismo lipídico;lesão inflamatória