Alpinetin이 척수 손상 랫드의 신경 기능 회복에 미치는 영향 및 기전

Huang Zhen-Feng ,  

Chen Meng-Ni ,  

Liu Jun ,  

Ye Zhi-Wei ,  

摘要

목적은 알피네틴(Alpinetin)이 척수 손상(SCI) 랫드의 신경 기능 회복에 미치는 영향과 그 기전을 연구하는 것이다. 개정된 Allen 충격법을 이용해 SCI 랫드 모델을 구축하였으며, 성공적으로 모델링된 랫드를 무작위로 SCI군, bpV(PTEN 억제제)군, Alpinetin-L군, Alpinetin-H군, Alpinetin-H+LY294002(PI3K 억제제)군으로 각각 12마리씩 나누고, 12마리의 건강한 정상 SD 랫드를 대조군으로 하였다. 투약 종료 후 BBB 점수, Reuter 점수, 경사판 각도, 피질 체감 유발 전위(CSEP) 잠복기 검사를 시행하였다. ELISA로 인터루킨(IL)-1β, IL-6, 종양괴사인자(TNF)-α 수치를 측정하였고, HE 염색으로 척수 조직 병리 변화를 관찰하였다. Nissl 염색으로 척수 조직 전각 운동신경세포의 형태 및 수를 관찰하였으며, TUNEL 염색으로 신경세포 사멸 상태를 평가하였다. 면역조직화학법으로 자가포식 관련 단백질 발현을 측정했고, 웨스턴블롯팅으로 세포사멸 및 PTEN/PI3K/Akt 신호경로 관련 단백질 발현을 확인하였다. 대조군과 비교할 때 SCI군은 척수 조직 구조가 심각하게 파괴되고, 괴사 조직 및 반점 출혈이 뚜렷하며, 다량의 염증 세포 침윤과 함께 신경세포 핵이 응축되고 괴사하여 배열이 희박하고 혼란스러우며, Nissl 염색이 옅고 신경세포 수가 감소하였다. BBB 점수, 경사판 각도 및 p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt 비율이 감소하였고, CSEP 잠복기는 연장되었으며, Reuter 점수, IL-1β, IL-6, TNF-α 수치, 세포 사멸률, caspase-3, C-caspase-3 발현량, Beclin1, Atg5, p-PTEN/PTEN 비율이 증가하였다(P<0.05). bpV군, Alpinetin-L군, Alpinetin-H군은 SCI군에 비해 척수 조직 병리 손상이 현저히 개선되어 구조가 비교적 규칙적이고, 공동이 점차 줄어들며, 염증 세포 침윤이 경감되고 Nissl 염색이 짙어지고 신경세포 수가 증가하였다. BBB 점수, 경사판 각도, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt 비율은 증가하였으며, CSEP 잠복기는 단축되었고, Reuter 점수, IL-1β, IL-6, TNF-α 수치, 세포 사멸률, caspase-3, C-caspase-3 발현량, Beclin1, Atg5, p-PTEN/PTEN 비율이 감소하였다(P<0.05). Alpinetin-H+LY294002군은 Alpinetin-H군에 비해 척수 조직 병리 손상이 심해지고, BBB 점수, 경사판 각도, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt 비율이 감소했으며, CSEP 잠복기가 연장되고, Reuter 점수, IL-1β, IL-6, TNF-α 수치, 세포 사멸률, caspase-3, C-caspase-3 발현량, Beclin1, Atg5, p-PTEN/PTEN 비율이 증가하였다(P<0.05). 결론적으로 Alpinetin은 SCI 랫드의 신경 기능 회복을 촉진할 수 있으며, 이는 PTEN/PI3K/Akt 신호경로 억제와 관련이 있을 수 있다.

关键词

Alpinetin; PTEN/PI3K/Akt 신호경로; 척수 손상; 신경 기능 회복

阅读全文