L'objectif est d'examiner l'effet de la protéine de liaison X-box 1 (XBP1) dérivée des macrophages de type M2 sur la résistance des cellules du cancer colorectal (CRC) à l'oxaliplatine (Ox) en régulant la protéine liant l'élément de régulation stéroïde 2 (SREBP2). Méthodes : les cellules HCT116, SW480 et LoVo ont été cultivées dans un milieu contenant Ox pendant 48 heures. La lignée cellulaire la plus sensible à Ox a été sélectionnée, et un modèle de résistance CRC-Ox a été établi par augmentation progressive de la concentration du médicament. Des milieux conditionnés M0 (M0-CM) et M2 (M2-CM) ont été appliqués aux cellules parentales sensibles à Ox (HCT116-S) et aux cellules résistantes à Ox (HCT116-R). Les effets de M0-CM et M2-CM sur HCT116-S et HCT116-R ont été observés, les groupes étant M0-CM+HCT116-S, M2-CM+HCT116-S, M0-CM+HCT116-R, et M2-CM+HCT116-R. Pour étudier l'impact de l'activation de XBP1 dans les macrophages M2 sur la croissance des cellules HCT116 et leur résistance à Ox, les cellules HCT116-R ont été divisées en groupe contrôle à expression négative élevée M2-CM (M2^oe-NC-CM, avec macrophages M2 transfectés avec oe-NC, milieu conditionné co-cultivé avec HCT116-R), groupe M2^oe-NC-CM+Ox (même condition avec traitement Ox 4 μg/ml), groupe à surexpression XBP1 M2-CM (M2^oe-XBP1-CM, macrophages M2 transfectés avec plasmide XBP1, milieu conditionné co-cultivé) et groupe M2^oe-XBP1-CM+Ox (même condition avec traitement Ox). Pour étudier l'effet de la suppression de SREBP2 sur HCT116-R, les cellules ont été divisées en groupe contrôle normal, groupe siRNA SREBP2 (si-SREBP2), groupe M2^oe-XBP1-CM, et groupe si-SREBP2+M2^oe-XBP1-CM. Les tests CCK-8, Transwell et cytométrie en flux ont été utilisés pour évaluer la viabilité, l'invasion, et l'apoptose des cellules HCT116. L'expression de l'ARNm de SREBP2 a été détectée par qRT-PCR, et les niveaux des protéines XBP1 et SREBP2 par western blot. Un modèle animal de souris nues avec inoculation sous-cutanée de macrophages M2 transfectés (vecteur vide ou oe-XBP1) et cellules HCT116 a été établi pour comparer volumes et poids tumoraux, et l'immunohistochimie a permis de détecter l'expression de XBP1 et SREBP2 dans les tumeurs. Résultats : le test CCK-8 a montré qu'Ox inhibe significativement la viabilité des cellules HCT116 comparé aux cellules SW480 et LoVo (P<0,05). Par rapport à M0-CM+HCT116-S, le groupe M2-CM+HCT116-S présentait une viabilité et une invasion cellulaires significativement accrues, avec un taux d'apoptose diminué (P<0,05). Des résultats similaires ont été observés entre M0-CM+HCT116-R et M2-CM+HCT116-R (P<0,05). Les niveaux de protéine XBP1 étaient significativement plus élevés dans HCT116-R du groupe M2-CM+HCT116-R (P<0,05). Par rapport à M2^oe-NC-CM, la viabilité et l'invasion augmentaient dans M2^oe-XBP1-CM, avec une diminution de l'apoptose (P<0,05). L'expression de SREBP2 en ARNm et protéine était significativement accrue dans le groupe surexprimant XBP1 comparé à M2^oe-NC-CM+Ox (P<0,05). Par rapport au contrôle, le groupe si-SREBP2 présentait une diminution de la viabilité et de l'invasion, avec une augmentation de l'apoptose (P<0,05). Par rapport à M2^oe-XBP1-CM, le groupe si-SREBP2+M2^oe-XBP1-CM montrait une baisse de viabilité et d'invasion, avec une augmentation de l'apoptose (P<0,05). Les expériences in vivo ont démontré que la surexpression de XBP1 inverse l'inhibition de la croissance tumorale par Ox (P<0,05) et augmente l'expression de SREBP2 (P<0,05). Conclusion : XBP1 dérivé des macrophages M2 favorise la résistance des cellules CRC à Ox en activant SREBP2.

Macrophages de type M2; protéine de liaison X-box 1; cancer colorectal; oxaliplatine