L'objectif de l'étude était d'examiner l'effet de miR-185-5p sur la prolifération, la migration et la capacité autophagique des cellules d'adénocarcinome pulmonaire en régulant négativement la protéine 1 de la super-famille 9 transmembranaire (TM9SF1). Méthodes: les données GSE51853 ont été téléchargées de la base de données d'expression génique intégrée (GEO), et l'expression de miR-185-5p dans les tissus d'adénocarcinome pulmonaire a été analysée. Les sites miR-185-5p liés aux protéines prédites ont été prédits à l'aide de la base de données en ligne miRTargetLink, miRTarbase et DIANA-microT-CD, et les protéines liées à l'autophagie ont été téléchargées à partir du site HADb. Ensuite, les résultats obtenus à partir de 4 bases de données ont été combinés, et la survie de VEGFA et de TM9SF1 a été analysée à l'aide de la base de données StarBase. Les cellules HEK-293T ont été cotransfectées avec des plasmides rapporteurs miR-185-5p contrôle ou en excès et avec l'UTR 3' de TM9SF1 ou une mutation de l'UTR 3' de TM9SF1. L'expression de la protéine TM9SF1 dans les cellules A549 a été déterminée à l'aide de Western blotting après la transfection de miR-185-5p surabondant. Les cellules A549 ont été divisées en 3 groupes: (1) groupe CON + NC, transfecté avec les plasmides témoins miR-185-5p et les plasmides témoins TM9SF1; (2) groupe over-miR-185-5p + NC, transfecté avec des plasmides miR-185-5p en excès et des plasmides témoins TM9SF1; (3) groupe over-miR-185-5p + over-TM9SF1, transfecté avec des plasmides miR-185-5p en excès et des plasmides TM9SF1 en excès. L'efficacité de la prolifération cellulaire, la cicatrisation des blessures et la migration cellulaire ont été vérifiées à l'aide d'essais de marquage de l'EdU, de grattage et de Transwell pour vérifier l'effet de miR-185-5p sur la prolifération et la migration des cellules d'adénocarcinome pulmonaire, cible de la régulation négative de TM9SF1. L'augmentation de la capacité autophagique des cellules A549 sous l'influence de mIR-185-5p a été déterminée à l'aide de la structure autophagique stubRFP-sensGFP-LC3, et le changement du potentiel de la membrane mitochondriale (MMP) des cellules A549 a été déterminé à l'aide de l'essai JC-1. Résultats: dans l'ensemble de données GSE51853, le niveau d'expression de mIR-185-5p dans les tissus d'adénocarcinome pulmonaire était nettement plus faible que dans les tissus pulmonaires normaux (P<0.01). Les résultats du qRT-PCR ont montré que le niveau d'expression de mIR-185-5p dans les cellules d'adénocarcinome pulmonaire NCI-H1299 et A549 était nettement plus faible que dans les cellules épithéliales pulmonaires normales BEAS-2B (P<0.01). Les résultats prédictifs ont montré que mIR-185-5p pourrait réguler les protéines liées à l'autophagie TM9SF1. Les résultats des essais de marquage de l'EdU, de grattage et de Transwell ont montré qu'un excès de mIR-185-5p pourrait inhiber la prolifération et la capacité de migration des cellules, et qu'un excès de TM9SF1 pourrait atténuer l'effet inhibiteur de mIR-185-5p sur la prolifération et la migration des cellules d'adénocarcinome pulmonaire (P<0.05). Les résultats de l'essai de marquage de l'EdU, de grattage et de Transwell ont montré qu'un excès de mIR-185-5p pourrait inhiber la prolifération et la capacité de migration des cellules, et qu'un excès de TM9SF1 pourrait atténuer l'effet inhibiteur de mIR-185-5p sur la prolifération et la migration des cellules d'adénocarcinome pulmonaire (P<0.05). Les résultats de l'essai de marquage de l'EdU, de grattage et de Transwell ont montré qu'un excès de mIR-185-5p pourrait inhiber la prolifération et la capacité de migration des cellules, et qu'un excès de TM9SF1 pourrait atténuer l'effet inhibiteur de mIR-185-5p sur la prolifération et la migration des cellules d'adénocarcinome pulmonaire (P<0.05). Les résultats de l'essai de marquage de l'EdU, de grattage et de Transwell ont montré qu'un excès de mIR-185-5p pourrait inhiber la prolifération et la capacité de migration des cellules, et qu'un excès de TM9SF1 pourrait atténuer l'effet inhibiteur de mIR-185-5p sur la prolifération et la migration des cellules d'adénocarcinome pulmonaire (P<0.05). Les résultats de l'essai de marquage de l'EdU, de grattage et de Transwell ont montré qu'un excès de mi
关键词
lung adenocarcinoma;miR-185-5p;transmembrane 9 superfamily protein 1;proliferation;migration;autophagy