L'objectif est d'explorer l'effet des nanovésicules de type exosome dérivées de l'aubépine (HDELNs) sur les lésions induites par le triméthylamine N-oxyde (TMAO) dans les cellules endothéliales de la veine ombilicale humaine (HUVECs) ainsi que leurs mécanismes. Méthodes : Les HUVECs primaires ont été cultivées dans un milieu spécifique ; les HDELNs ont été extraites de l'aubépine par centrifugation différentielle et par centrifugation en gradient de densité de saccharose. L'identification a été réalisée par microscopie électronique en transmission, analyse de suivi des nanoparticules, coloration au bleu de Coomassie et Western blot. (1) Groupes témoins (HUVECs cultivées normalement), groupes avec gradients de concentration de TMAO (150, 300, 600, 900, 1800, 3600 μmol/L, 24 h), groupes avec gradient temporel (900 μmol/L de TMAO traité pendant 4, 8, 12, 24, 48 h), groupes avec gradient de concentration de HDELNs (1×10^6 à 1×10^11 particules/ml, 24 h). La viabilité cellulaire a été évaluée par la méthode CCK-8 ; les protéines ICAM-1, VCAM-1, MMP-9 et IL-1β ont été quantifiées par Western blot. (2) Groupes témoin, TMAO, HDELNs, TMAO+HDELNs ; viabilité cellulaire et expression des protéines ICAM-1, VCAM-1, MMP-9, IL-1β, eNOS, PPAR-γ mesurées ; expression PPAR-γ par qPCR ; contenu ATP, activité SOD, potentiel membranaire mitochondrial, ROS et superoxyde détectés par diverses méthodes. (3) Groupes additionnels avec inhibiteurs et agonistes PPAR-γ à différentes concentrations associés à TMAO et HDELNs. (4) Études combinées. Résultats : La centrifugation différentielle et le gradient de densité au saccharose ont permis d'extraire des nanovésicules homogènes à double membrane issues de l'aubépine. La coloration bleu de Coomassie a visualisé les bandes protéiques des HDELNs. La méthode CCK-8 a montré que le TMAO à 900 μmol/L pendant 24 h réduit significativement la viabilité cellulaire des HUVECs (P<0.01), alors que 1×10^7 particules/ml de HDELNs restaurent cette viabilité (P<0.01). Le Western blot a révélé une augmentation des protéines ICAM-1, VCAM-1, MMP-9 et IL-1β sous TMAO (P<0.05), et une diminution de l’expression d’eNOS (P<0.01), retournées par les HDELNs (P<0.05). Le dosage de la luciférase a montré une réduction de l’ATP induite par TMAO (P<0.0001) et une restauration par les HDELNs (P<0.0001). L’activité SOD2 réduite par TMAO (P<0.01) est restaurée par les HDELNs (P<0.001). Les sondes fluorescentes ont détecté une augmentation du stress oxydatif et une baisse du potentiel membranaire mitochondrial liée au TMAO (P<0.01), inversée par les HDELNs (P<0.001). Le Western blot et le qPCR ont montré une baisse de l’expression de PPAR-γ sous TMAO (P<0.01) restaurée par HDELNs (P<0.05). Les tests combinés ont démontré que l’antagoniste PPAR-γ T0070907 (30 μmol/L) inhibe l’action réparatrice des HDELNs (P<0.05), tandis que l’agoniste rosiglitazone (50 μmol/L) la favorise (P<0.05). Conclusion : Les HDELNs atténuent significativement les lésions des HUVECs induites par TMAO, probablement via la voie de signalisation PPAR-γ.

athérosclérose;exosomes végétaux;récepteur activé par le proliférateur de péroxysome γ