La guanosine de mangue active la voie de signalisation Nrf2/HO-1 dans l'apoptose induite par hSOD1G93A dans les cellules NSC-34 de souris

Su Bo-Yang ,  

He Zheng-Qing ,  

Liu Jing ,  

Li Mao ,  

Huang Xu-Sheng ,  

摘要

Le but de cette étude était d'explorer l'impact de la guanosine de mangue (MG) sur l'apoptose du modèle de cellules de sclérose latérale amyotrophique (SLA) en régulant la voie de signalisation facteur nucléaire E2 apparenté 2/hémooxygénase-1 (Nrf2/HO-1). Méthodes (1) Les lignées cellulaires NSC-34 transfectées avec un plasmide hSOD1WT et un plasmide hSOD1G93A ont été réparties au hasard dans un groupe témoin, un groupe modèle, un groupe MG (100 μmol/L) et un groupe MG (200 μmol/L) ; les cellules ont été traitées avec de la MG pendant 24 h. La viabilité cellulaire a été évaluée par la méthode CCK-8 ; la cytotoxicité cellulaire a été mesurée à l'aide du kit de dosage de la lactate déshydrogénase (LDH) ; les niveaux d'interleukine (IL)-1β et d'IL-18 dans le surnageant ont été mesurés par ELISA ; l'expression de Nrf2, HO-1, le réductase de la NADPH quinone 1 (NQO-1), la protéine 3 semblable à NOD (NLRP3), la chiffre mitochondrial D (GSDMD)-N et la caspase-1 a été détectée par Western blotting. (2) Les cellules NSC-34 dérivées de souris hSOD1G93A ont été réparties au hasard dans un groupe modèle, un groupe MG (200 μmol/L), un groupe siARN-Nrf2 et un groupe siARN-Nrf2+MG (200 μmol/L) ; les cellules ont été transfectées avec du siARN-Nrf2 par transfection transitoire avec le LipofectamineTM 3000 ; l'expression de Nrf2, HO-1, NQO-1, NLRP3, la caspase-1 et GSDMD-N a été mesurée par Western blotting. Résultats (1) Les résultats de la méthode CCK-8 ont montré qu'après un traitement de 24 h avec MG à des concentrations de 300 μmol/L ou moins, la viabilité des cellules NSC-34 hSOD1G93A n'a pas changé de manière significative (P>0,05). Par rapport au groupe témoin, le groupe modèle a présenté une augmentation significative du taux de LDH dans le surnageant des cultures cellulaires et des niveaux d'IL-1β et d'IL-18 (P<0,001), ainsi qu'une diminution de l'expression des protéines Nrf2, HO-1 et NQO-1 (P<0,05 ou P<0,01) et une augmentation de l'expression des protéines NLRP3, caspase-1 et GSDMD-N (P<0,05 ou P<0,01 ou P<0,001). Par rapport au groupe modèle, les concentrations de LDH dans le surnageant, d'IL-18 et d'IL-1β ont diminué dans le groupe MG (100 μmol/L) et dans le groupe MG (200 μmol/L) (P<0,001), de même que l'expression des protéines NLRP3, caspase-1 et GSDMD-N (P<0,05 ou P<0,001), tandis que l'expression des protéines Nrf2, HO-1 et NQO-1 a augmenté (P<0,05 ou P<0,01). (2) Par rapport au groupe modèle, l'expression des protéines Nrf2, HO-1 et NQO-1 a considérablement augmenté dans le groupe MG (200 μmol/L) de cellules NSC-34 de souris hSOD1G93A (P<0,05 ou P<0,001), tandis que dans le groupe siARN-Nrf2, l'expression des protéines Nrf2 et HO-1 a diminué (P<0,01 ou P<0,001) et celle des protéines NLRP3, caspase-1 et GSDMD-N a augmenté (P<0,001). Par rapport au groupe siARN-Nrf2, l'expression des protéines Nrf2, HO-1 et NQO-1 a augmenté dans le groupe siARN-Nrf2+MG (200 μmol/L) (P<0,01 ou P<0,001), tandis que l'expression des protéines NLRP3, caspase-1 et GSDMD-N a diminué (P<0,001). Conclusion La MG peut inhiber l'apoptose du modèle de cellules SLA via la voie de signalisation Nrf2/HO-1, ce qui confère une protection cellulaire.

关键词

sclérose latérale amyotrophique; guanosine de mangue; facteur nucléaire E2 apparenté 2; apoptose cellulaire; voie de signalisation

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