L'objectif de cette étude est d'explorer l'impact et le mécanisme de l'ubiquitin associé au domaine de la protéine 2 (UBAC2) méthylation m⁶A sur l'invasion et la migration des cellules cancer colorectal. Méthodes : Analyse de l'expression de l'ARNm UBAC2 dans les tissus du cancer colorectal et des tissus adjonctifs normaux à différents stades du cancer à l'aide de la base de données GEPIA2.0, et analyse de la corrélation de l'expression de Wilms Tumor 1-related protein (WTAP) avec UBAC2. Analyse de la corrélation entre UBAC2 et la survie globale des patients atteints de cancer colorectal à l'aide de l'outil en ligne Kaplan-Meier plotter. Prédiction des sites potentiels de méthylation m⁶A dans le gène UBAC2 à l'aide des bases de données RMVar et SRAMP. Détection du niveau d'expression de l'ARNm et de la protéine UBAC2 dans différentes lignées cellulaires de cancer colorectal à l'aide de qRT-PCR et de Western blotting, respectivement. Les expériences de suppression de l'UBAC2 ont été conduites en utilisant des cellules de cancer colorectal SW480, qui ont été divisées en un groupe témoin (sans traitement), un groupe sh-NC (transfectées avec un contrôle négatif sh-NC) et un groupe sh-UBAC2 (transfectées avec un sh-UBAC2). Les expériences de suppression de WTAP ont été réalisées en utilisant un groupe témoin (sans traitement), un groupe si-NC (transfectées avec un siRNA de contrôle négatif) et un groupe si-WTAP (transfecté avec un siRNA de suppression de WTAP). Les expériences de surexpression d'UBAC2 ont été menées en utilisant un groupe témoin (sans traitement), un groupe si-WTAP (transfectées avec un vecteur vide pcDNA3.1) et un groupe si-WTAP+OE-UBAC2 (transfectées avec un vecteur de surexpression pcDNA3.1-UBAC2). Détermination du niveau d'expression des protéines UBAC2, WTAP, E-cadhérine, N-cadhérine et vimentine par Western blotting ; détermination du niveau d'expression de l'ARNm UBAC2 par qRT-PCR ; détermination de la capacité d'invasion et de migration cellulaire à l'aide de Transwell. Détermination du niveau de méthylation m⁶A de l'ARNm UBAC2 par MeRIP-qPCR ; validation de la liaison de l'ARNm WTAP avec UBAC2 par RIP-qPCR. Comparé au groupe témoin, le niveau d'expression de la protéine E-cadhérine dans les cellules SW480 du groupe sh-UBAC2 augmente significativement, les niveaux de protéines N-cadhérine et vimentine diminuent significativement, et le nombre de cellules d'invasion et de migration diminue de manière significative (P<0,05). L'analyse de base de données GEPIA2.0 a montré qu'il existe une corrélation positive entre WTAP et UBAC2 (r=0,24, P<0,001). Comparé au groupe si-NC, le niveau d'expression des protéines WTAP et de l'ARNm et de la protéine UBAC2 dans les cellules SW480 du groupe si-WTAP diminue significativement (P<0,05). Les résultats des expériences MeRIP-qPCR ont montré que comparé au groupe si-NC, le niveau de méthylation m⁶A de l'ARNm UBAC2 dans les cellules du groupe si-WTAP diminue significativement (P<0,05). Les résultats de l'expérience RIP-qPCR ont également confirmé la capacité de WTAP à se lier à l'ARNm UBAC2. Comparé au groupe témoin, le niveau d'expression de la protéine E-cadhérine dans les cellules SW480 du groupe si-WTAP augmente significativement, les niveaux de protéines N-cadhérine et vimentine diminuent significativement (P<0,05); comparé au groupe si-WTAP, le niveau d'expression de la protéine E-cadhérine dans les cellules SW480 du groupe si-WTAP+OE-UBAC2 diminue significativement, les niveaux de protéines N-cadhérine et vimentine augmentent significativement (P<0,05). Le nombre de métastases dans les poumons des souris du groupe LV-sh-UBAC2 est nettement inférieur à celui du groupe LV-sh-NC, et le niveau d'expression de l'ARNm Luc2 dans les tissus pulmonaires est nettement inférieur à celui du groupe LV-sh-NC (P<0,05). Conclusions : La méthylation m⁶A, associée à UBAC2, peut réguler le processus de transition épithéliale-mésenchymateuse (EMT) des cellules du cancer colorectal, et donc affecter leur capacité d'invasion et de migration.

cancer colorectal; protéine associée à l'ubiquitine liée à 2; méthylation m⁶A; Protéine liée à Wilms Tumor 1; invasion; migration