Effet protecteur des composés sécrétés des cellules souches mésenchymateuses cultivées en 3D sur les neurones de l'hippocampe de souris soumis à une immersion dans l'eau de mer accompagnée d'une lésion par étirement
L'objectif est d'étudier l'effet protecteur des composés sécrétés des cellules souches mésenchymateuses (CSM) en culture tridimensionnelle sur les neurones de l'hippocampe de souris soumis à une immersion dans l'eau de mer (SW) associée à une lésion par étirement (SI), offrant ainsi une nouvelle perspective pour la réparation neuronale après une lésion cérébrale traumatique (TBI) associée à SW. La méthode utilise la culture en suspension des CSM et recueille le milieu de culture (CM) contenant les composés sécrétés des CSM. Un modèle de cellules SW et SI est établi avec des neurones de l'hippocampe de souris (cellules HT22). Les cellules HT22 sont réparties en groupe témoin, groupe SI, groupe SI+SW, groupe SI+CM et groupe SI+SW+CM. La viabilité cellulaire de chaque groupe est mesurée par la méthode CCK-8, le taux d'apoptose cellulaire est mesuré par cytométrie en flux, la capacité de migration cellulaire est mesurée par un test de grattage cellulaire, et les niveaux d'expression des protéines liées à l'apoptose Bcl-2, Bax, ACSL4 et COX-2 sont mesurés par Western blot. Les résultats montrent une diminution significative de la viabilité des cellules HT22 après une immersion dans de l'eau de mer à 15% pendant 12 heures (P<0,05). Les résultats de la méthode CCK-8 montrent une diminution significative de la viabilité des cellules HT22 dans les groupes SI et SI+SW, par rapport au groupe témoin (P<0,0001). Après traitement avec le CM contenant les composés sécrétés des CSM, la viabilité des cellules du groupe SI+CM est significativement plus élevée que celle du groupe SI (P<0,0001), et la viabilité des cellules du groupe SI+SW+CM est significativement plus élevée que celle du groupe SI+SW (P<0,001). Les résultats de la cytométrie en flux montrent un taux d'apoptose significativement plus élevé dans les groupes SI et SI+SW que dans le groupe témoin (P<0,05 ou P<0,001), tandis que le taux d'apoptose du groupe SI+CM est significativement plus faible que celui du groupe SI (P<0,05), et le taux d'apoptose du groupe SI+SW+CM est significativement plus faible que celui du groupe SI+SW (P<0,05). Les résultats de Western blot montrent que par rapport au groupe témoin, l'expression de Bcl-2 est significativement réduite dans les groupes SI et SI+SW (P<0,01 ou P<0,0001), et l'expression de Bax, ACSL4 et COX-2 est significativement augmentée (P<0,01 ou P<0,001 ou P<0,0001); par rapport au groupe SI, l'expression de la protéine Bcl-2 est significativement augmentée dans le groupe SI+CM (P<0,05), tandis que l'expression de Bax, ACSL4 et COX-2 est significativement réduite (P<0,05); par rapport au groupe SI+SW, l'expression de Bcl-2 est significativement augmentée dans le groupe SI+SW+CM (P<0,01), et l'expression de Bax, ACSL4 et COX-2 est significativement réduite (P<0,01 ou P<0,001). Les résultats du test de grattage cellulaire montrent que les taux de migration cellulaire des groupes SI et SI+SW sont significativement inférieurs à celui du groupe témoin à 12 et 24 heures (P<0,01 ou P<0,0001), tandis que le taux de migration cellulaire du groupe SI+CM est significativement supérieur à celui du groupe SI (P<0,0001 ou P<0,01), et le taux de migration cellulaire du groupe SI+SW+CM est significativement supérieur à celui du groupe SI+SW (P<0,0001). Conclusion: Les composés sécrétés des CSM cultivées en suspension peuvent atténuer les lésions neuronales associées à une immersion dans l'eau de mer et une lésion par étirement, et pourraient devenir un traitement potentiel pour les TBI associés à SW.
关键词
cellules souches mésenchymateuses;composés sécrétés;immersion dans l'eau de mer;lésion cérébrale traumatique