L'objectif est de construire des organes rénaux et des modèles de lésions rénales aiguës et chroniques. Méthode: expérimentation de la formation des organes rénaux à l'aide de cellules souches embryonnaires humaines en utilisant la voie d'activation CHIR99021-facteur de croissance des fibroblastes (FGF). Stimulation des organes rénaux par la cisplatine à des concentrations de 20, 30 et 50 μmol/L pour construire un modèle d'organes rénaux induits par la cisplatine entraînant une lésion aigüe du tubule rénal, et stimulation par la cisplatine à une concentration de 30 μmol/L pendant 12, 24, 48 heures pour observer la tendance de l'évolution de ses lésions, utilisation de la PCR en temps réel quantitative inversée-transcription (RT-qPCR) et de l'immunohistochimie (IHC) pour détecter le niveau d'expression des indicateurs de lésions rénales et des facteurs inflammatoires. Utilisation de milieux de culture avec 5 et 25 mmol/L de glucose (changement tous les deux jours) et avec 25 mmol/L de glucose (changement continu) pendant 6 jours pour construire des modèles de lésions fibrotiques rénales induites par un excès de glucose et de présence continue de glucose, utilisation de la méthodologie de Western blot, RT-qPCR et IHC pour détecter le niveau d'expression des indicateurs protéiques de fibrose rénale collagène III (Col III), facteur de croissance transformant β (TGF-β) et oronectine. Résultats: Les organes commencent à former une structure tubulaire le 8ème jour, et la formation optimale se produit le 14ème jour, ce qui permet de les utiliser pour des études ultérieures. La coloration des marqueurs spécifiques des tubules rénaux proximaux (lectine de lotus, LTL), distants (protéine de liaison au calcium 1, CDH1), connectés (hormones régulatrices de l'urine, UMOD) et la coloration H-E confirment la formation des organes rénaux. Les niveaux d'expression des indicateurs de lésions rénales 1 (KIM-1), de la neutrophile gelatinase liée au transporteur lipidique (NGAL), du facteur de nécrose tumorale-α (TNF-α), de l'interleukine-1β (IL-1β) et du facteur de chimiotaxie-1β (CCL2) augmentent sensiblement après la stimulation à la cisplatine, indiquant une lésion rénale aiguë, et 30 μmol/L de cisplatine conduit à une lésion rénale optimale, et l'expression de NGAL et de KIM-1 augmente avec l'augmentation de la stimulation. Dans les deux modèles d'organes rénaux à haut taux de glucose, l'expression d'oronectine, de Col III et de TGF-β augmente sensiblement, mais le modèle de simulation des fluctuations de la glycémie est préférable au modèle de glucose continu. Conclusion - L'utilisation d'un processus de culture optimisé peut construire efficacement des organes rénaux et peut être utilisée pour construire des modèles de lésions rénales aiguës et chroniques.

Reins; organes; cellules souches pluripotentes induites; lésion rénale induite par la cisplatine; maladie rénale diabétique