Ziel der Studie ist es, die Wirkung von X-box-Bindeprotein 1 (XBP1), das von M2-Makrophagen stammt, auf die Oxaliplatin (Ox)-Resistenz von kolorektalen Krebszellen (CRC) durch Regulierung des Sterolregulator-Element-Bindeproteins 2 (SREBP2) zu untersuchen. Methode: HCT116-, SW480- und LoVo-Zellen wurden 48 Stunden lang in Ox-haltigem Medium kultiviert. Die Ox-sensibelste Zelllinie wurde ausgewählt, und eine CRC-Ox-resistente Zelllinie wurde durch schrittweise Erhöhung der Medikamentenkonzentration etabliert. M0-Bedingungsmedium (M0-CM) und M2-CM wurden verwendet, um Ox-empfindliche elterliche Zellen (HCT116-S) und Ox-resistente Zellen (HCT116-R) zu behandeln. Die Auswirkungen von M0-CM und M2-CM auf HCT116-S und HCT116-R wurden beobachtet, wobei sie in die Gruppen M0-CM+HCT116-S, M2-CM+HCT116-S, M0-CM+HCT116-R und M2-CM+HCT116-R unterteilt wurden. Um die Wirkung der Aktivierung von XBP1 in M2-Makrophagen auf das Wachstum von HCT116-Zellen und die Ox-Resistenz zu untersuchen, wurden HCT116-R-Zellen in die Überexpressions-negativkontrollgruppe M2-CM (M2^oe-NC-CM-Gruppe; M2-Makrophagen mit oe-NC transfiziert, CM gewonnen und mit HCT116-R gemeinsam kultiviert), M2^oe-NC-CM+Ox-Gruppe (mit 4 μg/ml Ox behandelt), Überexpression XBP1 M2-CM-Gruppe (M2^oe-XBP1-CM; M2-Makrophagen mit XBP1-Plasmid transfiziert, CM mit HCT116-R kultiviert) und M2^oe-XBP1-CM+Ox-Gruppe (ähnlich mit Ox-Behandlung) eingeteilt. Zur Untersuchung der Auswirkungen der SREBP2-Herunterregulierung auf HCT116-R-Zellen wurden Kontrollgruppe (unbehandelt), si-SREBP2-Gruppe (si-SREBP2 in HCT116-R transfiziert), M2^oe-XBP1-CM-Gruppe und si-SREBP2+M2^oe-XBP1-CM-Gruppe etabliert. CCK-8-Test, Transwell-Assay und Durchflusszytometrie wurden zur Bewertung der Zellviabilität, Invasionsfähigkeit und Apoptose von HCT116-Zellen verwendet. Die SREBP2-mRNA-Expression wurde mittels qRT-PCR und die Proteinexpression von XBP1 und SREBP2 mittels Western Blot analysiert. In einem subkutanen Xenotransplantat-Modell bei Nacktmäusen wurden M2-Makrophagen mit leerem Vektor oder oe-XBP1 und HCT116-Zellen injiziert. Tumorvolumen und -gewicht wurden verglichen, und die Immunhistochemie wurde zur Detektion von XBP1 und SREBP2 im Tumor eingesetzt. Ergebnisse: Der CCK-8-Test zeigte, dass Ox die Zellviabilität von HCT116 im Vergleich zu SW480 und LoVo signifikant reduzierte (P<0,05). Im Vergleich zu M0-CM+HCT116-S wiesen die M2-CM+HCT116-S-Zellen eine deutlich erhöhte Vitalität und Invasionsfähigkeit sowie eine verringerte Apoptoserate auf (P<0,05). Ähnliche Ergebnisse zeigten sich bei M2-CM+HCT116-R im Vergleich zu M0-CM+HCT116-R (P<0,05). XBP1-Proteinniveau war in HCT116-R Zellen der M2-CM+HCT116-R-Gruppe signifikant höher als in der M0-CM+HCT116-R-Gruppe (P<0,05). Im Vergleich zur M2^oe-NC-CM-Gruppe zeigte die M2^oe-XBP1-CM-Gruppe erhöhte Zellvitalität und Invasionsfähigkeit sowie eine verringerte Apoptoserate (P<0,05). Die Überexpression von XBP1 erhöhte signifikant die mRNA- und Proteinausdrucke von SREBP2 (P<0,05) im Vergleich zur M2^oe-NC-CM+Ox-Gruppe. Die si-SREBP2-Gruppe zeigte eine verringerte Zellvitalität und Invasionsfähigkeit sowie eine erhöhte Apoptoserate im Vergleich zur Kontrollgruppe (P<0,05). Die si-SREBP2+M2^oe-XBP1-CM-Gruppe zeigte eine verminderte Zellvitalität und Invasionsfähigkeit sowie eine erhöhte Apoptoserate im Vergleich zur M2^oe-XBP1-CM-Gruppe (P<0,05). In-vivo-Analysen zeigten, dass die Überexpression von XBP1 die Ox-induzierte Tumorwachstumshemmung reversierte (P<0,05) und die SREBP2-Expression erhöhte (P<0,05). Schlussfolgerung: Das von M2-Makrophagen abgeleitete XBP1 fördert die Ox-Resistenz von CRC-Zellen durch Aktivierung von SREBP2.

M2-Makrophagen; X-box-Bindeprotein 1; kolorektaler Krebs; Oxaliplatin