Ziel ist es, die Rolle der Peptidylprolylisomerase 1 (Pin1) in den Zervixkarzinomzellen bei der Regulation der Stammzellfunktion und der Induktion des epithelialen-mesenchymalen Übergangs (EMT) zu untersuchen. Es wurden die Zelllinien des Zervixkarzinoms Siha (Plattenepithelkarzinom) und Hela (Adenokarzinom) ausgewählt und stabile Zelllinien mit niedriger Pin1-Expression unter Verwendung der langsamen Virusübertragungstechnik konstruiert, die in 3 Gruppen unterteilt wurden: Niedrig-Expressionsgruppe 1 (shPin1-1), Niedrig-Expressionsgruppe 2 (shPin1-2) und Kontrollgruppe (shPin1-NON). Es wurde qRT-PCR und Western-Blotting verwendet, um die Expression von Messenger-RNA und Proteinen der Transkriptionsfaktoren 2 des SRY-Box-Gens (SOX2), der Aldehyddehydrogenase 1A1 (ALDH1A1) und des Zelladhäsionsmoleküls 44 (CD44) in den Zervixkarzinomzellen nach Reduktion der Pin1-Expression zu untersuchen. Die Bildung von Zervixkarzinom-Stammzellen wurde unter Verwendung der Serumfreien Kugelbildungsmethode induziert, und die adhärente Kultivierung von Zervixkarzinomzellen wurde als Kontrolle verwendet, dann wurde die Expression von SOX2, ALDH1A1 und CD44 mittels qRT-PCR und Western-Blotting überprüft. Es wurde der Kugelbildungsversuch verwendet, um die Kugelbildung von Zervixkarzinomzellen in den verschiedenen Gruppen nach Reduzierung von Pin1 zu bewerten, auch wurde der Transwell-Versuch verwendet, um die Migrations- und Invasionsfähigkeit der Zellen in den verschiedenen Gruppen zu bewerten, und qRT-PCR und Western-Blotting wurden verwendet, um die Expression von epithelialen Proteinen und der Übergangsproteine E-Cadherin, N-Cadherin und der Transkriptionskomplexe der aktivierenden Proteine 1 (AP-1) c-Jun und c-Fos in den Zellen der verschiedenen Gruppen zu bewerten. Die Kombination von Immunfluoreszenz mit dem immunpräzipitierten Coprecipitationstest wurde verwendet, um die Interaktion und Colokalisierung von Pin1 mit c-Jun nachzuweisen. Die Ergebnisse zeigten, dass die Expression von Pin1, SOX2, ALDH1A1 und CD44 in den Zellen Siha und Hela in den Gruppen shPin1-1 und shPin1-2 im Vergleich zur Gruppe shPin1-NON signifikant abnahm (P<0,05). Die Expression von Messenger-RNA und Proteinen von SOX2, ALDH1A1 und CD44 in den serumfreien Zervixkarzinom-Stammzellen war signifikant höher als in den adhärenten Zervixkarzinomzellen (P<0,05). Im Vergleich zur Gruppe shPin1-NON nahmen die Kugelbildungsfähigkeit und die Migrations- und Invasionsfähigkeit der Zellen in den Gruppen shPin1-1 und shPin1-2 signifikant ab (P<0,05), die Expression von Messenger-RNA und Proteinen von E-Cadherin stieg signifikant an (P<0,05), während die Expression von Messenger-RNA und Proteinen von N-Cadherin in den Gruppen shPin1-1 und shPin1-2 signifikant abnahm (P<0,05). Die Expression von Messenger-RNA und Proteinen von c-Jun und c-Fos in den Gruppen shPin1-1 und shPin1-2 war signifikant niedriger als in der Gruppe shPin1-NON (P<0,05). Es wird geschlossen, dass die Reduktion von Pin1 die Stammzellenfunktion und die Migrations- und Invasionsfähigkeit der Zervixkarzinomzellen inhibieren kann, und dass Pin1 die EMT durch die Regulation von AP-1 in den Zervixkarzinomzellen induzieren kann.

Zervixkarzinom; Tumor-Stammzellen; NIMA-interagierende Prolil-Isomerase; epithelialer-mesenchymaler Übergang