Polycomb-ähnliches Protein 2 fördert Migration und Invasion von Gliomzellen durch Aktivierung des NF-κB-Signalwegs

Ruan Jian-Qiao ,  

Wang Jing ,  

Zhang Ming-Hui ,  

Zhang Ning-Mei ,  

Cao Xiang-Mei ,  

摘要

Ziel ist es, die Wirkung von Polycomb-ähnlichem Protein 2 (PCL2) auf die Bewegung, Migrationsfähigkeit von Gliomzellen und die Expression von extrazellulären Matrix (ECM)-assoziierten Proteinen zu beobachten und die Rolle von PCL2 bei der Invasion von Gliomen zu untersuchen. Methoden: Analyse der PCL2-Expression in Gliomen anhand der Daten des Cancer Genome Atlas (TCGA) und des Chinese Glioma Genome Atlas (CGGA). Es wurden 90 Gliomgewebeproben vom Allgemeinen Krankenhaus der Medizinischen Universität Ningxia gesammelt; Geschlecht, Alter und Erkrankungsort der Patienten wurden erfasst; die PCL2-Expressionsniveaus in verschiedenen histologischen Gliomgrade (II, III, IV) wurden mittels Immunhistochemie bestimmt. Ein Lentivirus-Vektor wurde konstruiert, und Gliomzellen U87-MG wurden in Kontrollgruppe, Überexpressionsgruppe für PCL2 (hPCL2) und Herunterregulierungsgruppe für PCL2 (shPCL2) eingeteilt. Kratz- und Transwell-Assays wurden verwendet, um Bewegung, Migration und Invasion der U87-MG-Zellen zu untersuchen; RNA-Sequenzierung (RNA-seq) zur Analyse differentiell exprimierter Gene (DEGs) und deren Funktionen; Western Blot zur Bestimmung der ECM-assoziierten Proteine Matrix-Metalloproteinasen (MMP) 7, MMP9 sowie Transkriptionsfaktoren des NF-κB-Signalwegs wie Urokinase-Plasminogenaktivator (PLAU), Interleukin-8 (IL-8) und Tissue-Inhibitor von Metalloproteinasen 2 (TIMP2). Ergebnisse: Die Analyse von TCGA- und CGGA-Daten zeigte, dass die Expression des PCL2-Gens im Gliom signifikant höher ist als im angrenzenden Gewebe (P<0.05) und in hochgradigen Gliomen (III, IV) höher als in niedriggradigen (II) (P<0.001). Die positive PCL2-Expressionsrate bei Gliompatienten betrug 75,6 % (68/90), davon 48,3 % (14/29) in Grad II, 87,5 % (14/16) in Grad III und 82,2 % (37/45) in Grad IV. Kratz- und Transwell-Tests zeigten im Vergleich zur Kontrollgruppe, dass der relative Kratzabstand in der hPCL2-Gruppe abnahm (P<0.05), die Zellmigration deutlich anstieg (P<0.05); in der shPCL2-Gruppe nahm der relative Kratzabstand zu (P<0.05). Die RNA-seq-Analyse identifizierte 57 DEGs in den Gruppen hPCL2 und shPCL2 im Vergleich zur Kontrolle; zwischen hPCL2 und shPCL2 wurden 119 DEGs ermittelt; die GO-Anreicherungsanalyse zeigte Funktionsanreicherungen in ECM-Remodellierungswegen u.a. Western Blot zeigte, dass im Vergleich zur Kontrolle die Expressionslevels von MMP9, MMP7, PLAU und IL-8 in der hPCL2-Gruppe signifikant erhöht waren (P<0.05), während TIMP2 signifikant erniedrigt war (P<0.05); in der shPCL2-Gruppe waren MMP9, MMP7, PLAU und IL-8 signifikant erniedrigt (P<0.05), TIMP2 signifikant erhöht (P<0.05). Schlussfolgerung: PCL2 kann die Beweglichkeit und Migrationsfähigkeit von Gliomzellen verstärken; der Mechanismus könnte mit der Aktivierung des NF-κB-Signalwegs zusammenhängen.

关键词

Polycomb-ähnliches Protein 2;Gliom;Invasion;extrazelluläre Matrix;Nuklearer Faktor-κB

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