الهدف هو استكشاف تأثير microRNA-22-3p (miR-22-3p) على تكاثر واستماتة خلايا طراز الحويصلات الهوائية التي يحرضها المكورات الرئوية وعلاقته ببروتين التفاعل مع ثيوريدوكسين (TXNIP). الطريقة تم تقسيم خلايا الطراز الحويصلي الثاني (AECⅡ) عشوائياً إلى مجموعة ضابطة، مجموعة نموذج، مجموعة miR-NC، مجموعة miR-22-3p المحاكاة، مجموعة si-NC، مجموعة si-TXNIP، مجموعة miR-22-3p المحاكاة + pcDNA3.1، مجموعة miR-22-3p المحاكاة + pcDNA3.1-TXNIP؛ في المجموعة الضابطة لم تُعالج الخلايا، في مجموعة النموذج أُصيب الخلايا بالمكورات الرئوية، في باقي المجموعات نُقلت miRNA أو DNA قبل الإصابة بالمكورات الرئوية. تم استخدام qRT-PCR للكشف عن مستويات تعبير miR-22-3p وTXNIP mRNA؛ تم استخدام طريقة CCK-8 لاختبار قدرة الخلايا على التكاثر؛ تم استخدام تلوين Annexin V لاختبار الاستماتة الخلوية؛ تم استخدام ELISA للقياس مستويات الإنترلوكين (IL)-10 وIL-6؛ تم فحص التعبير البروتيني لكل من Bcl-2 المرتبط ببروتين سرطان الخلايا البائية للموت المرتبط بـ Bax، وBcl-2، والكاسبيز 3 المُنشط (Cleaved caspase-3)، وTXNIP بواسطة Western blotting؛ تجارب مراسل اللوسيفيراز المزدوجة استخدمت للتأكد من العلاقة المستهدفة بين miR-22-3p وTXNIP. النتائج مقارنة بالمجموعة الضابطة، انخفضت قدرة التكاثر ومستويات التعبير miR-22-3p، IL-10 ومستوى تعبير بروتين Bcl-2 في مجموعة النموذج (P<0.05)، وكذلك ارتفعت معدلات الاستماتة، مستويات التعبير لـ TXNIP mRNA وIL-6، فضلاً عن مستويات بروتين Bax وCleaved caspase-3 وTXNIP (P<0.05). مقارنة بمجموعتي النموذج وmiR-NC، ارتفع في مجموعة miR-22-3p المحاكاة قدرة التكاثر ومستويات miR-22-3p وIL-10 ومستوى تعبير بروتين Bcl-2 (P<0.05)، بينما انخفضت الاستماتة، وTXNIP mRNA وIL-6 وBax وCleaved caspase-3 وTXNIP (P<0.05). في مجموعة si-TXNIP لم تظهر فروق ذات دلالة إحصائية في مستويات miR-22-3p (P>0.05)، في حين ارتفعت قدرة التكاثر، IL-10 ومستوى تعبير بروتين Bcl-2 (P<0.05)، وانخفضت الاستماتة، وTXNIP mRNA وIL-6 وBax وCleaved caspase-3 وTXNIP (P<0.05). مقارنة بمجموعة miR-22-3p المحاكاة ومجموعة miR-22-3p المحاكاة + pcDNA3.1، لم يكن هناك فرق واضح في مستويات miR-22-3p في مجموعة miR-22-3p المحاكاة + pcDNA3.1-TXNIP (P>0.05)، بينما انخفضت قدرة التكاثر، IL-10 ومستوى تعبير بروتين Bcl-2 (P<0.05)، وارتفعت الاستماتة، وTXNIP mRNA وIL-6 وBax وCleaved caspase-3 وTXNIP (P<0.05). توجد علاقة استهداف بين miR-22-3p وTXNIP. الخلاصة تعبير مفرط لـ miR-22-3p يمكنه تثبيط تعبير TXNIP وبالتالي تثبيط استماتة خلايا الطراز الحويصلي التي يحرضها المكورات الرئوية وتعزيز تكاثر الخلايا.
关键词
microRNA-22-3p; بروتين التفاعل مع ثيوريدوكسين; المكورات الرئوية; خلايا الطراز الحويصلي; تكاثر; استماتة