الهدف هو دراسة تأثير بروتين ربط صندوق إكس من النوع M2 (XBP1) المستمد من البلاعم من النوع M2 على مقاومة خلايا سرطان القولون والمستقيم (CRC) لأوكساليبلاتين (Ox) من خلال تنظيم بروتين ربط عنصر الدرجة المصلب (SREBP2). الطريقة: تم زراعة خلايا HCT116 وSW480 وLoVo في وسط يحتوي على Ox لمدة 48 ساعة، ثم اختيار أكثر الخطوط الخلوية حساسية لـ Ox وإنشاء خطوط خلايا مقاومة لـ CRC-Ox باستخدام طريقة زيادة تراكيز الدواء. تم استخدام وسط زراعة M0 (M0-CM) ووسط M2 (M2-CM) لمعالجة خلايا HCT116 الحساسة (HCT116-S) والمقاومة (HCT116-R) للأوكساليبلاتين، وتمت مراقبة تأثيرهما وفقًا للحالة المعالجة وتقسيمها إلى مجموعات M0-CM+HCT116-S، M2-CM+HCT116-S، M0-CM+HCT116-R، وM2-CM+HCT116-R. لدراسة تأثير تنشيط XBP1 في بلاعم النوع M2 على نمو خلايا HCT116 ومقاومة Ox، تم تقسيم خلايا HCT116-R إلى مجموعة التحكم الإيجابية (M2^oe-NC-CM: وسط من بلاعم M2 محورة مع oe-NC مع خلايا HCT116-R)، مجموعة M2^oe-NC-CM+Ox (بلاعم M2 المحورة مع oe-NC بوجود 4 ميكروغرام/مل Ox مع خلايا HCT116-R)، مجموعة M2^oe-XBP1-CM (بلاعم M2 محورة مع استنساخ زائد لـ XBP1 مع خلايا HCT116-R)، ومجموعة M2^oe-XBP1-CM+Ox (بلاعم M2 محورة مع استنساخ زائد لـ XBP1 مع 4 ميكروغرام/مل Ox مع خلايا HCT116-R). لدراسة تأثير تثبيط SREBP2 في خلايا HCT116-R، تم تقسيمها إلى مجموعة التحكم الطبيعية، مجموعة si-SREBP2 (تم تثبيط SREBP2 باستخدام siRNA في HCT116-R)، مجموعة M2^oe-XBP1-CM، ومجموعة si-SREBP2+M2^oe-XBP1-CM. استُخدم اختبار CCK-8، تجارب Transwell، وتحليل التدفق الخلوي لقياس حيوية خلايا HCT116، قدرة الغزو، ومعدل الاستماتة. كما تم قياس مستوى mRNA لبروتين SREBP2 باستخدام qRT-PCR ومستوى بروتينات XBP1 وSREBP2 باستخدام Western blot. في نموذج حيواني تحت الجلد في الفئران العارية، قُسّم التوزيع حسب الحوامل المحورة في بلاعم M2 والخلايا HCT116، وقُيس حجم ووزن الأورام، مع استخدام التلوين المناعي الكيميائي لقياس التعبير عن XBP1 وSREBP2. النتائج أظهرت أن Ox يثبط بوضوح حيوية خلايا HCT116 مقارنة بخطوط خلايا SW480 وLoVo (P<0.05). مقارنةً بمجموعة M0-CM+HCT116-S، أظهرت مجموعة M2-CM+HCT116-S زيادة ملحوظة في الحيوية وقدرة الغزو، وانخفاضًا ملحوظًا في معدل الاستماتة (P<0.05)، والملاحظة نفسها كانت في المقارنة بين مجموعتي M0-CM+HCT116-R وM2-CM+HCT116-R (P<0.05). كان مستوى بروتين XBP1 مرتفعًا بشكل ملحوظ في خلايا HCT116-R بمجموعة M2-CM+HCT116-R مقارنة بمجموعة M0-CM+HCT116-R (P<0.05). مقارنة بمجموعة M2^oe-NC-CM، ارتفعت الحيوية وقدرة الغزو وانخفض معدل الاستماتة في مجموعة M2^oe-XBP1-CM (P<0.05). وبالمقارنة بين مجموعة M2^oe-NC-CM+Ox، زاد التعبير عن mRNA وبروتين SREBP2 بشكل ملحوظ في مجموعة التعبير الزائد لـ XBP1 (P<0.05). مقارنة بمجموعة التحكم الطبيعي، انخفضت الحيوية وقدرة الغزو مع زيادة معدل الاستماتة في مجموعة si-SREBP2 (P<0.05). مقارنة بمجموعة M2^oe-XBP1-CM، انخفضت الحيوية وقدرة الغزو مع زيادة معدل الاستماتة في مجموعة si-SREBP2+M2^oe-XBP1-CM (P<0.05). أظهرت التجارب الحيوانية أن التعبير الزائد لـ XBP1 عكس التأثير المثبط لـ Ox على نمو الأورام (P<0.05) وعزز تعبير SREBP2 (P<0.05). الخلاصة: يعزز XBP1 المستمد من البلاعم M2 مقاومة خلايا سرطان القولون والمستقيم لأوكساليبلاتين من خلال تنشيط SREBP2.

بلاعم النوع M2; بروتين ربط صندوق إكس 1; سرطان القولون والمستقيم; أوكساليبلاتين