تأثير روديولا فورسيثيا على مسار مسار MAPK/ERK/mTOR في الأوتوفاجة والبرمجة الخلوية المحتضرة في الهيبوكامبو

Tang Chao ,  

Cao Yan-Qun ,  

Chen Chao-Liang ,  

Zhou Ju-Xiang ,  

摘要

هدفت هذه الدراسة إلى استكشاف تأثير الروديولا فورسيثيا على تنظيم مسار إشارات البروتينات الكينازية المنشطة للتقسية (MAPK) / إنزيم الرسول الخارجي (ERK) / الجسيمات الهدف من راباميسين الثدييات (mTOR) ، وتأثيره على الأوتوفاجة والبرمجة الخلوية للخلايا العصبية في الهيبوكامبو المُعوَّض بالأكسجين والسكر (OGD/R). وقد تمثلت الطريقة في زرع الخلايا العصبية HT22 لفار الأبيض في العيش في المختبر وتقسيمها عشوائيًا إلى مجموعة السيطرة ومجموعة OGD/R ومجموعة الروديولا فورسيثيا ومجموعة TBHQ ومجموعة الروديولا فورسيثيا + TBHQ. قُمعت جميع المجموعات باستثناء مجموعة السيطرة بولاية الهيبوكامبو الناجمة عن التعويض الأكسجيني السكري (OGD/R). ثم خضعت الخلايا في كل مجموعة للتدخل بالروديولا فورسيثيا (500 مائة ميكرولتر) و(أو) أكسدة البروتينات تي بيو هيدروكينون (TBHQ) (50 ميكرولتر) لمدة 24 ساعة. وتم قياس معدل إطلاق إنزيم اللبنيات (LDH) في الخلايا في كل مجموعة ، واستخدام تقنية النثر المنسي لاكتشاف معدل برمجة الخلايا ، واستخدام طريقة MTT لقياس حيوية الخلوي ، واستخدام تكنولوجيا AO لصبغ تلك الخلايا بأورانج النيندرين. وقد تم قياس مستوى المواد اللاتية الطليعة للبلازما (IL)-6, IL-8, IL-17 وعامل النخر الورمي-α (TNF-α) في الخلايا في كل مجموعة باستخدام طريقة ELISA. وتم عمل فحص Western blotting لقياس مستوى البروتينات ذات الصلة ببرمجة الخلايا والأوتوفاجة ومسار الإشارات MAPK/ERK/mTOR. وقد أظهرت النتائج أن 500 مائة ميكرولتر من الروديولا فورسيثيا يمكن أن تزيد بشكل واضح من قوة خلايا HT22 المحملة بها OGD/R (P<0.05) ، وأن تأثير قوة خلايا HT22 المزروعة بشكل طبيعي غير واضح (P>0.05). بالمقارنة مع مجموعة السيطرة ، زاد معدل إطلاق إنزيم اللبنيات في الخلايا المصحوبة OGD/R ، معدل برمجة الخلايا ، معدل تكوين الأوتوفاجة ، مستوى العوامل اللاتية الطليعة (IL-6, IL-8, IL-17 وTNF-α) ، إشارات البروتينات ذات الصلة ببرمجة الخلايا Bcl-2 (Bax)、المنتج المشقوق للكاسبيز Caspase-3 وكاسبيز-3 Caspase-3 وبروتين Beclin-1 ، ونسبة سلسلة 3 الخفيفة المرتبطة بالتيوبات الدقيقة (LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ ، نسبة الكايناز المنشطة للتقسية والفسفورة المنشطة p38 MAPK/p38 MAPK وERK1/2/يرك1/2 زاد (P<0.05) ، وخفضت قوة الخلايا ونسبة الفسفورة p-mTOR/mTOR (P<0.05). بالمقارنة مع مجموعة OGD/R ، خفضت مجموعة الروديولا فورسيثيا معدل إطلاق إنزيم اللبنيات في الخلايا المُصَاحَبة ، معدل برمجة الخلايا ، معدل تكوين الأوتوفاجة ، مستوى المواد اللاتية الطليعة (IL-6, IL-8, IL-17, TNF-α) ، وبروتينات Bcl-2 المتعلقة بهاربتة Bax، المنتج المشقوق للكاسبيز Caspase-3 وكاسبيز-3 Caspase-3 وبيكلين 1 Beclin-1 ، والنسبة LC3Ⅱ/LC3Ⅰ، الفسفورة p-p38 MAPK/p38 MAPK، وأرك 1/2/يرك1/2 (P<0.05) ، وزادت قوة الخلايا والفسفورة p-mTOR/mTOR (P<0.05) ؛ وأظهرت مجموعة TBHQ اتجاه تغيير معايير الخلايا معاكس لمجموعة الروديولا فورسيثيا (P<0.05). بالمقارنة مع مجموعة الروديولا فورسيثيا ، زادت مجموعة الروديولا فورسيثيا + TBHQ معدل إطلاق إنزيم اللبنيات في الخلايا المُصَاحَبة ، معدل برمجة الخلايا ، معدل تكوين الأوتوفاجة ، مستوى المواد اللاتية الطليعة (IL-6, IL-8, IL-17, TNF-α) ، النسبة Bax، المنتج المشقوق للكاسبيز Caspase-3 وكاسبيز-3 Caspase-3 وبيكلين 1 Beclin-1 ، ونسبة LC3Ⅱ/LC3Ⅰ، الفسفورة p-p38 MAPK/p38 MAPK، وأرك 1/2/يرك1/2 زاد (P<0.05) ، وخفضت قوة الخلايا والفسفورة p-mTOR/mTOR (P<0.05). ومن هذا الجهة ، فقد أظهرت الدراسة أن مستخلص R.F. للأعشاب الطبية قد يقوم بتثبيط مسار إشارات مسار الإشارات MAPK/ERK/mTOR المستمد من OGD/R بحيث يقلل من الأوتوفاجة والبرمجة الخلوية للخلايا العصبية في الهيبوكامبو.

关键词

روديولا فورسيثيا ، الأكسجين والسكر المُعوَّض، بروتينات الكينازية المنشطة للتقسية، الخلايا العصبية في الهيبوكامبو، الأوتوفاجة، البرمجة الخلوية

阅读全文