تهدف هذه الدراسة إلى استكشاف تأثير miR-185-5p في الهدف السلبي للتحكم في بروتين TM9SF1 عبر الغشاء على النمو والتهاجر وقدرة الأوتوفاجية لخلايا سرطان الرئة. تم تحليل تعبير miR-185-5p في أنسجة سرطان الرئة باستخدام مجموعة البيانات GSE51853 في قاعدة بيانات التعبير الجيني (GEO). تم استخدام قاعدة بيانات الرابط miRTargetLink وميتاربيس وديانا-ميكرو تي-دي لتوقع الأحماض الأمينية التي تستهدف miR-185-5p ، وتم تنزيل البروتينات ذات الصلة بالأوتوفاجية باستخدام موقع HADb. تم استخراج النتائج من القاعدات الأربعة وتحليلها باستخدام قاعدة بيانات StarBase لرسم منحنى البقاء للنتائج المشتركة VEGFA وTM9SF1. تم تغطية خلايا HEK-293T بمسار متعدد الإشارة يحملT TM9SF1 3'UTR(WT) أو TM9SF1 3'UTR(MUT) بالمقارنة مع ناقل miR-185-5p(CON) أو ناقل miR-185-5p الزائد (miR-185-5p). تم استخدام تجربة جين التقرير الثنائي المشع ونتائج تحليل البروتين الغربية لامتحان نقطة التشبع miR-185-5p وTM9SF1 في خلايا A549 المحولة. تم تقسيم خلايا A549 إلى 3 مجموعات: (1) مجموعة CON+NC ، المحولة بشكل مشترك miR-185-5p ضد ناقل miR-185-5p لكتلة الربط وTM9SF1 ضد ناقل TM9SF1 لكتلة الربط ؛ (2) مجموعة over-miR-185-5p+NC ، وتحويل miR-185-5p الزائد وناقل TM9SF1 لكتلة الربط ؛ (3) مجموعة over-miR-185-5p+over-TM9SF1 ، وتحويل miR-185-5p الزائد وتحويل TM9SF1 الزائد. تم إجراء تجارب الزيادة في الخلايا EdU وتجارب الجرح وتجارب الهجرة بشبكة Transwell للتحقق من تأثير تحكم miR-185-5p في الربط TM9SF1 على نمو خلايا سرطان الرئة وقدرتها على التهاجر. تم تحقيق تدفقات الأوتوفاجية المتعددة الألوان على شبكة stubRFP-sensGFP-LC3 وتحقيق JC-1 لتغيير تدفق الأوتوفاجية وتغير جهد الغشاء الميتوكوندري (MMP) في خلايا سرطان الرئة. في مجموعة البيانات GSE51853 ، كان مستوى التعبير ل miR-185-5p في أنسجة سرطان الرئة أدنى بشكل ملحوظ من الأنسجة الطبيعية للرئة (P<0.01) ؛ أظهرت نتائج اختبار qRT-PCR أن مستوى التعبير ل miR-185-5p في خلايا سرطان الرئة NCI-H1299 وA549 أقل من الخلايا الظرفية للخلايا الرئوية الطبيعية BEAS-2B (P<0.01) . أظهرت نتائج توقعات قاعدة البيانات عبر الإنترنت miRTargetLink وميتار بيس وديانا-ميكرو تي-دي وHADb أن miR-185-5p يمكنها التحكم في البروتينات ذات الصلة بالأوتوفاجية TM9SF1. أظهرت نتائج تجارب الزيادة في الجينات ونتائج تحليل البروتين الغربي على التوالي أن miR-185-5p يمكنها الارتباط مباشرة مع منطقة 3'UTR من ميزنة TM9SF1 mRNA ، وبعد زيادة تعبير miR-185-5p يقلل مستوى البروتين الهدف TM9SF1 (P<0.05) . أظهرت نتائج تجارب الزيادة في الخلايا EdU وتجارب الجرح وتجارب الهجرة بشبكة Transwell أن زيادة عبور miR-185-5p يمكنها منع نمو خلايا سرطان الرئة وقدرتها على التهاجر ، وزيادة TM9SF1 يمكنها تخفيف التأثير المثبط ل miR-185-5p على نمو خلايا سرطان الرئة وقدرتها على التهاجر (P<0.05) . أظهرت نتائج تدفقات الأوتوفاجية المتعددة الألوان ونتائج تحليل JC-1 أن زيادة عبور miR-185-5p يمكنها تسريع تدفق الأوتوفاجية في خلايا A549 ، وفي نفس الوقت ، زيادة عبور miR-185-5p وTM9SF1 يمكنها تباطئ تدفق الأوتوفاجية في خلايا A549 ؛ أظهرت نتائج تحليل JC-1 أن زيادة عبور miR-185-5p يمكنها خفض مستوى جهد الغشاء الميتوكوندري (MMP) في خلايا A549 ، وفي نفس الوقت ، زيادة عبور miR-185-5p و™9SF1 يمكنها زيادة مستوى الجهد الغشاء الميتوكوندري (MMP) في خلايا A549. يمكن أن يؤثر miR-185-5p على النمو والهجر وقدرة الأوتوفاجية في خلايا سرطان الرئة عن طريق التحكم في التعبير في TM9SF1.

سرطان الرئة; miR-185-5p; TM9SF1; نمو; هجرة; الأوتوفاجية