الهدف هو استكشاف دور الميكروRNA miR-221-5p / NLRP1 في تنظيم الالتهام الذاتي عبر جسيمات الإكسوسومات المعدلة بعامل نمو الخلايا الكبدية (HGF-MSCs) من الخلايا الجذعية الوسيطية (MSCs) وتأثيرها وآلياتها في تحوّل الظهارة إلى اللحمة (EMT) والالتهاب في خلايا ظهارة مجرى الهواء في التهاب قصيبات هوائية انسدادي (BO). في الأسلوب، تم إجراء فرط تعبير HGF في MSCs الحبل السري لفصل الإكسوسومات (HGF-MSCs-EXO). تم فحص شكل الإكسوسومات بواسطة المجهر الإلكتروني، وتحليل توزيع حجم الجسيمات بواسطة جهاز قياس حجم الجسيمات، وكشف تعبير بروتينات العلامة CD63 و TSG101 بواسطة التحليل الغربي، وفحص تعبير mRNA لـ HGF بواسطة qRT-PCR للتحقق من إنشاء HGF-MSCs-EXO. تم إنشاء نموذج فأر BO ونموذج في المختبر لخلايا TC-1 المحفزة LPS لBO، وتمت معالجة المجموعات بـ HGF-MSCs-EXO. تم تقييم تلف أنسجة القصبات الهوائية عبر الفحص النسجي، وتم كشف تعبير بروتينات الالتهام الذاتي (Beclin1، ATG5، p62) بواسطة التحليل الغربي، وقياس تركيز عوامل الالتهاب (IL-6، IL-1β، IFN-γ) بواسطة ELISA، وكذلك تعبير بروتينات علامة EMT (α-SMA، فيمين، E-cadherin). كما تم استخدام مثبطات ومحفزات miR-221-5p وتثبيط NLRP1، إلى جانب تجارب التقارير الثنائية اللوسيفيراز وتحليل CHIP-qPCR لتأكيد العلاقة الهدفية بين miR-221-5p و NLRP1 ودورهم في تنظيم BO بواسطة HGF-MSCs-EXO. النتائج أظهرت إنشاء HGF-MSCs-EXO بنجاح مع شكل الكوب أو الحويصلة تحت المجهر، وحجم جسيمات 30-150 نانومتر بتعبير عال لـ CD63 و TSG101 و mRNA لـ HGF. في نموذج الفأر، شهدت مجموعة BO تلفًا شديدًا في القصبات، مع علامات مفرطة في الالتهام الذاتي والالتهاب وEMT (الاختلافات ذات دلالة إحصائية P<0.05) في مقابل تحسن ملحوظ عند معالجة HGF-MSCs-EXO (P<0.05). في المختبر، تم تأكيد تحلل خلية عن طريق الفلورسنت PKH26، مع نتائج الالتهام الذاتي والالتهاب وEMT مطابقة للنموذج الحيواني، حيث كان miR-221-5p منخفضًا وNLRP1 مرتفعًا (P<0.05)، مع عكس هذه التغيرات بواسطة HGF-MSCs-EXO (P<0.05). أظهر تعديل HGF زيادة miR-221-5p في MSCs والإكسوسومات (P<0.05)، وتثبيط miR-221-5p عكس تأثير HGF-MSCs-EXO على الالتهام الذاتي (P<0.05). تحفيز miR-221-5p في النماذج الداخلية والخارجية رفع التعبير وأدى إلى تحسين بارز لتلف الأنسجة وكبح الالتهام الذاتي والالتهاب وEMT (P<0.05). أكدت تجارب اللوسيفيراز والثنائية CHIP-qPCR الارتباط الهدف لـ miR-221-5p مع NLRP1؛ وأظهرت تجارب النقل انخفاض mRNA و بروتين NLRP1 بمثبط miR-221-5p، وارتفاعهما بالمحفز (P<0.05)؛ وتثبيط NLRP1 قلّد تأثير miR-221-5p، مع عكس المثبط لذلك (P<0.05). أكدت تجربة في الفئران أن مجموعة النموذج كانت ذات تعبير عالي لـ NLRP1 mRNA و البروتين مقارنةً بالمجموعة الضابطة (P<0.05)، في حين كانت مجموعة المحفز منخفضة (P<0.05) والمجموعة المعالجة بـ HGF-MSCs-EXO عالية مقارنة بالمحفز (P<0.05). أخيرًا، مقارنةً بمجموعة ضابطة مع تثبيط، أظهرت مجموعة HGF-MSCs-EXO مع تثبيط NLRP1 تعبير منخفض لـ NLRP1 وتلفًا نسيجيًا محسنًا، وتأثيرات قوية على مؤشرات الالتهام الذاتي والالتهاب وEMT (P<0.05). يناقش البحث كيف يمكن لـ HGF-MSCs-EXO، عبر توصيل miR-221-5p، قمع تعبير NLRP1 لاستيراد الالتهام الذاتي وتخفيف تحوّل الظهارة إلى اللحمة والالتهاب في خلايا ظهارة الهواء في BO، مقدماً هدفًا علاجيًا وتوجهاً جديدًا لعلاج BO.

HGF-MSCs;جسيمات إكسوسومات;الالتهام الذاتي;التهاب قصيبات هوائية انسدادي