الهدف هو دراسة تأثير آلية تثبيط التعبير عن عضو عائلة نواقل المواد الذائبة 31 (SLC31A1) من خلال تنظيم استتباب النحاس على مرض الكبد الدهني الكحولي (AFLD) للفئران. تم تقسيم 30 فأرًا ذكرًا سليمًا من نوع C57BL/6N تتراوح أعمارهم بين 6-8 أسابيع عشوائياً إلى ثلاث مجموعات: مجموعة التحكم، مجموعة الإيثانول، ومجموعة البلازميد، كل منها تحتوي على 10 فئران. تم إطعام مجموعة التحكم بعلف سائل تحكمي يومياً، في حين أُطعمتا مجموعتا الإيثانول والبلازميد علفًا سائلاً يحتوي على الإيثانول يوميًا. استخدمت مجموعة البلازميد طريقة الهيدروديناميكية الوريدية لإعطاء 0.2 مل من بلازميد SLC31A1-sgRNA (2 ملغ/كغ) عن طريق الوريد الذيل، بينما أعطيت مجموعتا الإيثانول والتحكم حقن الوريد نفس حجم محلول الملح الفسيولوجي. في نهاية 8 أسابيع، تم سحب الدم عبر العين وذبح الفئران لأخذ الكبد. استُخدمت تقنية PCR الكمي الفلوري في الوقت الحقيقي (qPCR) وتحليل Western blotting لقياس مستويات تعبير mRNA والبروتين SLC31A1 في نسيج الكبد، كما أُجري كشف مناعة نسيجي (IHC) لتعبير SLC31A1 في نسيج الكبد، وقياس محتوى النحاس في نسيج الكبد والدم المصل. تم قياس نشاط إنزيم ديزmutase الفائق (SOD)، ومحتوى الجلوتاثيون (GSH)، والمالونالديهايد (MDA)، والكوليسترول الكلي (TC)، والثلاثي الغليسيريدات (TG) في نسيج الكبد باستخدام الطريقة الميكروية، بالإضافة إلى نشاط إنزيمات ALT وAST ومستويات TC وTG في الدم المصل. تم تقييم تلف الكبد، تراكم الدهون، وتغيرات الجليكوجين باستخدام صبغات الهيماتوكسيلين والإيوسين (HE)، وصبغة Oil Red O، وPAS على التوالي. فُحصت مستويات البروتين لعوامل مثل Nrf2، CYP2E1، AMPKα1، PPAR-α، NF-κB p65، IκB-α، JNK، وp38 MAPK باستخدام Western blotting. أظهرت النتائج أن بلازميد SLC31A1-sgRNA قادر على تثبيط تعبير SLC31A1 بشكل فعال (P < 0.001). بالمقارنة مع مجموعة التحكم، زادت درجات تلف الكبد ونسبة مساحة قطرات الدهون في مجموعة الإيثانول، وانخفضت نسبة المساحة الكولاجينية (P < 0.01 أو P < 0.001)؛ وزادت نسبة المساحة الإيجابية لـ SLC31A1، ومستويات mRNA والبروتين الخاصة به، بالإضافة إلى محتوى النحاس في نسيج الكبد والدم (P < 0.001)؛ وارتفع نشاط ALT وAST ومستويات MDA وTC وTG (P < 0.01 أو P < 0.001)، بينما انخفض نشاط SOD ومستوى GSH (P < 0.05 أو P < 0.001)؛ ارتفعت مستويات بروتين CYP2E1 ونسب p-JNK/JNK، p-p38 MAPK/p38 MAPK، p-NF-κB p65/NF-κB p65 وp-IκB-α/IκB-α (P < 0.05 أو P < 0.001)، في حين انخفضت مستويات بروتين Nrf2 وPPAR-α ونسبة p-AMPKα1/AMPKα1 (P < 0.05 أو P < 0.01). مقارنة بمجموعة الإيثانول، انخفضت درجات تلف الكبد ونسبة مساحة قطرات الدهون وزادت نسبة المساحة الكولاجينية في مجموعة البلازميد (P < 0.01 أو P < 0.001)؛ وانخفضت نسبة المساحة الإيجابية لـ SLC31A1 ومستويات mRNA والبروتين الخاصة به، وكذلك محتوى النحاس في نسيج الكبد والدم (P < 0.001)؛ وانخفضت نشاط ALT وAST ومستويات MDA وTC وTG (P < 0.05 أو P < 0.01 أو P < 0.001)، بينما ارتفع نشاط SOD ومستوى GSH (P < 0.05 أو P < 0.001)؛ وانخفضت مستويات بروتين CYP2E1 ونسب p-JNK/JNK، p-p38 MAPK/p38 MAPK، p-NF-κB p65/NF-κB p65 وp-IκB-α/IκB-α (P < 0.05 أو P < 0.01 أو P < 0.001)، في حين ارتفعت مستويات بروتين Nrf2 وPPAR-α ونسبة p-AMPKα1/AMPKα1 (P < 0.05 أو P < 0.01). الاستنتاج هو أن تثبيط SLC31A1 قد يخفف من ضمور الإجهاد التأكسدي واضطراب استقلاب الدهون والتلف الالتهابي في فئران AFLD من خلال تقليل محتوى النحاس، مما يقلل من تغيرات الكبد الدهني الناجمة عن الإيثانول.

مرض الكبد الدهني الكحولي;عضو عائلة نواقل المواد الذائبة 31;النحاس;الإجهاد التأكسدي;استقلاب الدهون;التلف الالتهابي