تهدف هذه الدراسة إلى استكشاف الدور الذي يلعبه circ_0044556 في تنظيم سلوك الخلايا السرطانية الخبيثة في سرطان الثدي الثلاثي السلبي عن طريق استهداف miR-338-3p / BRD4 وآليتها الجزيئية. تم استخدام موقع TargetScan عبر الإنترنت لتوقع نقاط ارتباط circ_0044556 مع miR-338-3p و miR-338-3p مع BRD4. تم قياس العلاقة بين circ_0044556 و miR-338-3p و BRD4 في خلايا MDA-MB-231 باستخدام تجربة تقريرين عن إنزيم اللوسفراز المزدوج. تم استخدام تقنية PCR في الوقت الحقيقي لقياس تعبير circ_0044556 و miR-338-3p وبروتين BRD4 في سلالات خلايا سرطان الثدي الثلاثي السلبي البشرية MDA-MB-231 وخلايا الطبقات الطبيعية للخلايا الظهارية لثدي MCF-10A. تم تقسيم خلايا MDA-MB-231 إلى مجموعات NC و si-NC (شديد النقص) و si-circ_0044556 (شديد النقص) و si-circ_0044556 +مثبط NC (شديد النقص ومثبط NC) و si-circ_0044556 + مثبط miR-338-3p (شديد النقص ومثبط miR-338-3p) ، وتم استخدام تقنية الPCR في الوقت الحقيقي لقياس تعبير circ_0044556 و miR-338-3p وبروتين BRD4 والبروتين الكالسيوم البشري (E-cadherin) وبروتين الكالسيوم العصبي (N-cadherin) وبروتين الوقوف. تم استخدام طريقة CCK-8 لقياس القدرة على الانقسام الخلوي ، وتم استخدام تقنية الخلايا التدفقية لقياس حالة الخلايا البرمجية للموت ، وتم استخدام تجربة ترانسويل لقياس القدرة على الاختراق والتحرك للخلايا. تم تقسيم 30 فأرًا عاريًا بشكل عشوائي إلى مجموعات NC (حقن بمحلول ملحي في الوريد الذيلي) ، وsi-NC (حقن بLV-NC في الوريد الذيلي) ، و si-circ_0044556 (حقن بLV-circ_0044556 في الوريد الذيلي) ، وsi-circ_0044556 +مثبط NC ( حقن بLV-circ_0044556 ومثبط antiagomir NC في الوريد الذيلي) و si-circ_0044556 + مثبط miR-338-3p (حقن بLV-circ_0044556 ومثبط antiagomir miR-338-3p) ، لكل منهما 6 فئران. تم حقن خلايا MDA-MB-231 تحت الجلد لبناء نموذج للزرع الورمي الغريبة ، وقياس حجم الورم والكتلة. أظهرت نتائج التوقعات من TargetScan أن miRNA الجرياني لـ circ_0044556 هو miR-338-3p ، وقد يكون الجين المستهدف لـ miR-338-3p في الجينوم هو BRD4. بالمقارنة مع شديد النقص نموذج NC ، انخفضت بشكل ملحوظ نشاط اللوسفراز لمؤشر WT-circ_0044556 (0.34±0.03 vs. 1.00±0.15 ، P<0.05) ، وكذلك نشاط اللوسفراز WT-BRD4 (0.41±0.05 vs 1.05±0.13 ، P<0.05) بعد تحويل نموذج MDA-MB-231 باستخدامmiR-338-3p mimic. بالمقارنة مع خلية MCF-10A ، زادت مستويات تعبير circ_0044556 وبروتين BRD4 بشكل ملحوظ في خلايا MDA-MB-231 ، وتقلصت مستويات تعبير miR-338-3p (P<0.05). بالمقارنة مع مجموعات NC و si-NC ، انخفضت مستويات تعبير circ_0044556 ومستويات البروتين BRD4 وN-cadherin وبروتين الوقوف وقيمة OD₄₅₀ بشكل ملحوظ ( P<0.05) في مجموعات si-circ_0044556 و si-circ_0044556+مثبط NC ، كما انخفض عدد الخلايا المهاجرة والغازلة بشكل ملحوظ (P<0.05) ، وزادت مستويات تعبير miR-338-3p ومستويات بروتين E-cadherin ، وارتفعت نسبة وفيات الخلايا بشكل ملحوظ ( P<0.05) ، بينما ساعد انخفاض miR-338-3p على إنقاذ تأثير العوائق لـ circ_0044556 على الهجرة والتحرك والانقسام لخلايا MDA-MB-231. بالمقارنة مع مجموعات NC و si-NC ، انخفضت حجم أورام الفأر بشكل ملحوظ في مجموعات si-circ_0044556 و si-circ_0044556+مثبط NC ، وانخفضت كتلة الأورام بشكل ملحوظ ( P<0.05) ؛ بالمقارنة مع مجموعات si-circ_0044556 و si-circ_0044556+مثبط NC ، ارتفع حجم الأورام بشكل ملحوظ في مجموعة si-circ_0044556+مثبط miR-338-3p ، وزادت كتلة الأورام بشكل ملحوظ ( P<0.05). الخلاصة: يمكن أن يساهم circ_0044556 في تحفيز سلوك الثدي الثلاثي السلبي السرطاني البيولوجي من خلال miR-338-3p / BRD4 بروتين وجزيئيا.

circ_0044556;miR-338-3p;bromodomain-containing protein 4;triple negative breast cancer;proliferation;migration;invasion