تأثير المركبات الإفرازية المشتقة من تربية الخلايا الجذعية الوسيطية ثلاثية الأبعاد المُربى من المادة الخلوية على حماية الخلايا العصبية في الهيبوكامبوس للفئران الإصابة المشتركة بلل البحر مع التمدد

Lan Xiao-Juan ,  

Xie Sheng-Qiang ,  

Wang Bing-Xian ,  

Ma Wen-Jing ,  

Chen Qiao-Mi ,  

Cheng Gang ,  

Lyu Wen-Ying ,  

Zhang Jian-Ning ,  

摘要

الهدف من هذا البحث هو تقصي دور المركبات الإفرازية المُشتقة من الخلايا الجذعية الوسيطية ثلاثية الأبعاد (MSCs) في حماية الخلايا العصبية في الهيبوكامبوس لفئران الإصابة المشتركة بلل البحر (SW) مع التمدد، وذلك بهدف افتحاض وسيلة جديدة لإعادة ترميم الخلايا العصبية بعد إصابة الدماغ الناجمة عن الإصابة المشتركة بلل البحر (TBI). تم تربية الـ MSCs بتقنية التربية بالتعليق، ثم تم جمع محاليل الزرع (CM) التي تحتوي على المركبات الإفرازية المشتقة من الـ MSCs. تم تأسيس نموذج خلايا الماوس العصبية في الهيبوكامبوس (خلية HT22) لنموذج الإصابة المشتركة بلل البحر مع التمدد. تم تقسيم الخلايا HT22 إلى مجموعات عشوائية تحتوي على مجموعة مرجعية، ومجموعة إصابة مشتركة (SI)، ومجموعة SI+SW، ومجموعة SI+CM، ومجموعة SI+SW+CM. تم استخدام طريقة CCK-8 لتقييم نشاط الخلايا في كل مجموعة، واستخدمت تقنية الفحص الجرياني لتقدير معدل الخلايا الميتة، وأجريت تجربة شق الخلية لتقييم قدرة الخلايا على الانتقال، واستخدمت تقنية ويسترن بلوت لرصد مستوى التعبير عن بروتينات الخلايا ذات الصلة بالموت مثل Bcl-2، Bax، ACSL4، COX-2. أظهرت النتائج أن نشاط الخلايا HT22 انخفض بشكل ملحوظ (P<0.05) بعد 12 ساعة من غمرها بلل البحر بتركيز 15%. أظهرت نتائج اختبار CCK-8 أن نشاط الخلايا HT22 في مجموعات SI وSI+SW انخفض بشكل ملحوظ مقارنة بالمجموعة المرجعية بعد 12 ساعة من المعالجة (P<0.0001). بعد معالجة الخلايا بالمركبات الإفرازية المشتقة من الـ MSCs، زاد نشاط الخلايا في مجموعة SI+CM بشكل ملحوظ مقارنة بالمجموعة SI (P<0.0001)، بالإضافة إلى ارتفاع نشاط الخلايا في مجموعة SI+SW+CM بشكل ملحوظ مقارنة بالمجموعة SI+SW (P<0.001). وأظهرت نتائج فحص الجرياني أن معدل الخلايا الميتة في مجموعات SI وSI+SW ارتفع بشكل ملحوظ مقارنة بالمجموعة المرجعية (P<0.05 أو P<0.001)، في حين انخفض معدل الخلايا الميتة في مجموعة SI+CM بشكل ملحوظ مقارنة بالمجموعة SI (P<0.05)، وانخفض معدل الخلايا الميتة في مجموعة SI+SW+CM بشكل ملحوظ مقارنة بالمجموعة SI+SW (P<0.05). أما نتائج فحص ويسترن بلوت فأظهرت أن مستوى التعبير عن بروتين Bcl-2 انخفض بشكل ملحوظ (P<0.01 أو P<0.0001) في مجموعات SI وSI+SW مقارنة بالمجموعة المرجعية. وزاد مستوى التعبير عن بروتينات Bax وACSL4 وCOX-2 بشكل ملحوظ (P<0.01 أو P<0.001 أو P<0.0001). وكمقارنة مع المجموعة SI، ارتفع مستوى التعبير عن بروتين Bcl-2 بشكل ملحوظ (P<0.05) في مجموعة SI+CM، وانخفض مستوى التعبير عن بروتينات Bax وACSL4 وCOX-2 بشكل ملحوظ (P<0.05). أما مقارنة مع المجموعة SI+SW، ارتفع مستوى التعبير عن بروتين Bcl-2 بشكل ملحوظ (P<0.01) في مجموعة SI+SW+CM، وانخفض مستوى التعبير عن بروتينات Bax وACSL4 وCOX-2 بشكل ملحوظ (P<0.01 أو P<0.001). أما نتائج تجربة شق الخلية فأظهرت أن معدل انتقال الخلايا في مجموعات SI وSI+SW انخفض بشكل ملحوظ مقارنة بالمجموعة المرجعية (P<0.01 أو P<0.0001) بعد 12 و24 ساعة. وبالمقارنة، زاد معدل انتقال الخلايا في مجموعة SI+CM بشكل ملحوظ مقارنة بالمجموعة SI (P<0.0001 أو P<0.01)، وزاد معدل انتقال الخلايا في مجموعة SI+SW+CM بشكل ملحوظ مقارنة بالمجموعة SI+SW (P<0.0001). يُظهر هذا البحث أن المركبات الإفرازية المشتقة من الـ MSCs المُربى بتقنية التربية بالتعليق يمكن أن تخفف الضرر الناتج عن الإصابة المشتركة بلل البحر مع التمدد في الخلايا العصبية، وقد تصبح وسيلة علاجية محتملة للإصابة المشتركة بلل البحر (TBI).

关键词

خلايا جذعية وسيطية؛ مركبات إفرازية؛ بلل البحر؛ إصابة دماغية ناتجة عن الإصابة

阅读全文