تحسين زراعة أعضاء الكلى ودراسة تطبيقاتها المبدئية

Shi Wen-Ying ,  

Xu Li-Jia ,  

Rui Hong-Liang ,  

Zhang Sen ,  

Zhou Xun-Rong ,  

摘要

الغرض من بناء أعضاء الكلى ونماذج الضرر الكلوي الحاد والمزمن. تم تشجيع تكوين الأعضاء الكلوية باستخدام طريقة تنشيط CHIR99021-عامل النمو الأليافي (FGF) باستخدام مسار الخلايا الجذعية الجنينية البشرية. تم استخدام 20، 30 و 50 ميكرولتر من سيسبلاتين لتحفيز الأعضاء الكلوية، وبناء نموذج أعضاء الكلى لمتلازمة أنابيب الكلى الحادة الناجمة عن سيسبلاتين، وتم استخدام 30 ميكرولتر من سيسبلاتين للتحفيز المستمر لمدة 12 و 24 و 48 ساعة لمراقبة اتجاهات تغيير الضرر الخاص به، وتم استخدام PCR عالي الإنتشار الزمني لإنقلاب النسخ (RT-qPCR) والكيمياء المناعية (IHC) لاختبار مؤشرات الضرر الكلوي وتعبير عوامل الالتهاب. تم بناء نموذجين لامتصاص الكلى بتموجات السكر العالية وسميك الدم بتركيز 5 و 25 ملي مول/لتر (تغيير كل يوم) وبتركيز 25 ملي مول/لتر (دون تغيير مستمر) ، وتم استخدام تقنية الفحص الغربي و RT-qPCR وطريقة IHC لاختبار مستويات التعبير البروتيني لمؤشرات تليف الكلى الكولاجين III (Col III) وعامل النمو المحول بيتا (TGF-β) والفروع الليفية (oronectin). أظهرت الأنتجة نموذج تكوين الأعضاء الكلوية في اليوم الثامن بنية أنبوبية أولية، وكانت لديها أفضل صورة في اليوم الرابع عشر، ويمكن استخدامها في الدراسات اللاحقة. ثبت صبغي المواد الإشارية للأنابيب الكلوية القريبة (اللطخة النجسة، LTL) ، والبعيدة (الجليكوبروتين 1، CDH1) ، والمتصلة (الهرمون القابض للبول، UMOD) وصبغ الهيماتوكسيلين واليوكرمية الكيميائية أن المواد الكيميائية الخاصة بتكوين أعضاء الكلى الكلوية. ارتفعت مستويات التعبير لدى أناج الضرر الكلوي 1 (KIM-1) وبروتين النقل المرتبط بالماصة الحمض الدهني (NGAL) وعامل الورم النسيجي-α (TNF-α) ونوعية الخلايا المناعية-1β (IL-1β) وجزء الجذب 2 (CCL2) بشكل واضح بعد تحفيز السيسبلاتين ، مما يشير إلى حدوث ضرر كلوي حاد، كانت أفضل القيم الخاصة بنموذج أعضاء الكلى الحاد الناجم عن 30 ميكرولتر من السيسبلاتين ، وزادت تعبير NGAL و KIM-1 مع زيادة وقت التحفيز. زاد تعبير الفروع الليفية وكولاجين III و TGF-β في نموذجي الكلى العالية الجلوكوز بشكل واضح ، لكن نموذج المحاكاة لتذبذب ضغط الدم الجلوكوزي كان أفضل من نموذج الجلوكوز المستمر. الاستنتاج الاستخدام المحسن لعملية التربية يمكن أن يبني بنيانًا فعالًا لأعضاء الكلى ، ويمكن استخدامه لبناء نماذج الأضرار الكلوية الحادة والمزمنة.

关键词

الكلى; أعضاء; الخلايا الجذعية متعددة القدرة المحفزة; الضرر الكلوي الناتج عن سيسبلاتين; مرض كلوي مصاحب للسكري

阅读全文