الغرض من هذه الدراسة هو استكشاف دور بروتين بين 1 (Pin1) في خلايا سرطان عنق الرحم في تحفيز الخصائص الجذعية للورم وتحفيز التحول من الظهارة إلى الأنسجة (EMT) وآلية الجزيئات. تم اختيار الخطوط الخلوية لسرطان عنق الرحم Siha (سرطان الخلايا الحرشانية) و Hela (القلفة) ، وتم إنشاء خطوط خلايا دائمة منخفضة تعبير Pin1 باستخدام تقنية الإنتقال البطيء للفيروسات. تم تقسيمها إلى 3 مجموعات وفقًا للمعالجة المختلفة: مجموعة الاختزال 1 (shPin1-1) ومجموعة الاختزال 2 (shPin1-2) ومجموعة الضابط (shPin1-NON). تم استخدام qRT-PCR و Western blotting لاختبار تعبير مين الجنس 2 (SOX2) وألدهيد ديهايدروجيناز 1A1 (ALDH1A1) وجسيم 44 للانتقال (CD44) لعينة السرطان عنق الرحم بعد اختزال Pin1. ولتحفيز خلية سرطان الرحم دون سيروم لتنتج خلايا رحمية كروية وقد عُدً عينة سرطان الرحم بالتجانس من خلال زراعتها على الجدران واستخدام qRT-PCR وويسترن بلوتينج لاختبار تعبير SOX2 و ALDH1A1 و CD44 للتحقق. تم استخدام تجربة تكوين الكرات لاختبار تكوين الكرات لخلية السرطان الرحم بعد الاختزال Pin1 ، واستخدام Transwell لاختبار قدرة الهجرة والاجتياح لخلايا المجموعات المختلفة. تم استخدام qRT-PCR وويسترن بلوتينج لاختبار البروتينات الفعالة لتحديد إن كانت جميع المجموعات الفرعية لخلية سرطان الرحم تظهر جينات E-كادهين (E-cadherin) و N-كادهين (N-cadherin) والبروتينات المفعولة في مختلف المجموعات. تم استخدام التناضح المناعي المشترك مع الترسيب المشترك لاختبار تفاعل Pin1 مع c-Jun والتواجد المشترك. وجد أن خلايا Siha و Hela بعد انخفاض Pin1 ، انخفاض مستويات تعبير المين 1، SOX2، ALDH1A1، CD44 mRNA والبروتينات بشكل واضح في shPin1-1 وshPin1-2 مقارنة بمجموعة shPin1-NON (P <0.05)؛ كان مستوى تعبير SOX2 و ALDH1A1 و CD44 لخلايا الكرة الرحمية بدون سيروم أعلى بشكل واضح من خلايا الرحم المعلقة (P <0.05). مقارنة بمجموعة shPin1-NON ، لوحظ انخفاض في قدرة الخلية على التحرك والاجتياح وكذلك انخفاض واضح في مستوى تعبير E-كادهين (P <0.05)، وكذلك انخفاض في مستوى تعبير N-كادهين (P <0.05)؛ تم العثور على أن تعبير c-Jun و c-Fos في shPin1-1 وshPin1-2 كان أقل مستوى بشكل واضح منه في مجموعة shPin1-NON (P <0.05). إن تقليل Pin1 يمكن أن يكبح الخصائص الجذعية وقدرة الخلية على التحرك والاجتياح ، وربما يكون Pin1 قادرًا على تحفيز تحفيز EMT لخلايا سرطان عنق الرحم.
关键词
سرطان عنق الرحم؛ خلايا سرطانية جذعية؛ NIMA ارتباط بيبتيدي ئينول إيزوميراز؛ التحول من الظهارة إلى الأنسجة